申请/专利权人：中国人民解放军总医院第一医学中心

申请日：2024-01-04

公开（公告）日：2024-03-19

公开（公告）号：CN117721171A

主分类号：C12Q1/02

分类号：C12Q1/02;C12N5/077

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.05#实质审查的生效;2024.03.19#公开

摘要：本发明涉及细胞实验领域，尤其涉及一种在细胞增殖过程中的氯化钴的加入方法，该方法包括激活实验载体；选择待培养人心肌细胞组；将所述待培养人心肌细胞组置于所述实验载体上进行增殖；在增殖过程中的选定的加入时刻加入若干浓度的氯化钴；通过利用实时无标记细胞分析仪记录的待培养人心肌细胞的成长情况确定在最佳加入时刻加入氯化钴的最佳浓度；按照最佳浓度和最佳加入时刻培养人心肌细胞以模拟构建待培养细胞在低氧环境下的活力状态，以进行观察或实验。通过培育人心肌细胞，并利用人心肌细胞在不同浓度的氯化钴加入之后的增殖状态来模拟人心肌细胞在低氧环境下的状态，便于进行低氧环境下的有效实验和观察，提高营造低氧环境的效率。

主权项：1.一种在细胞增殖过程中的氯化钴的加入方法，其特征在于，包括：激活实验载体，所述试验载体包括E-Plate16孔板和培养基；选择待培养人心肌细胞组，所述待培养人心肌细胞组包括AC16人心肌细胞、基因过表达组人心肌细胞、过表达空载对照组人心肌细胞、基因敲降组人心肌细胞以及敲降空载对照组人心肌细胞；将所述E-Plate16孔板从实时无标记细胞分析仪中取出，沿所述E-Plate16孔板的每个孔的边界吸掉所述培养基，以避免碰到底部电极；对于任意需要吸掉培养基的孔而言，预先设置有标准培养孔图像M0，存储在图像对比单元内，对于任意第i培养孔在吸掉培养基之后进行图像采集，形成实际培养孔图像Mi，将所述实际培养孔图像与所述标准培养孔图像进行比较，并根据比较结果确定是否加入人心肌细胞溶液；按照100μL孔体积将各人心肌细胞稀释液加入E-Plate16孔板中，使每孔内人心肌细胞的数量为5000个；将E-Plate16孔板在室温下静置30min，使人心肌细胞沉降到底部；将E-Plate16孔板，移入恒温细胞培养箱中的实时无标记细胞分析仪中，平衡15min后，所述恒温细胞培养箱的温度为37℃，且占比为5%；监测阻抗240h，每30min读取一次读数，观察各人心肌细胞的增殖曲线；在增殖过程中的选定的加入时刻加入若干浓度的氯化钴；通过利用实时无标记细胞分析仪记录的所述待培养人心肌细胞的成长情况确定在最佳加入时刻加入氯化钴的最佳浓度；按照所述最佳浓度和最佳加入时刻培养人心肌细胞以模拟构建待培养细胞在低氧环境下的活力状态，以进行观察或实验。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 中国人民解放军总医院第一医学中心 在细胞增殖过程中的氯化钴的加入方法

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