申请/专利权人:武汉华美生物工程有限公司
申请日:2024-01-30
公开(公告)日:2024-03-22
公开(公告)号:CN117737000A
主分类号:C12N5/20
分类号:C12N5/20
优先权:
专利状态码:在审-实质审查的生效
法律状态:2024.04.09#实质审查的生效;2024.03.22#公开
摘要:本发明公开了一种杂交瘤细胞高效融合的方法,具体为:先用含有还原剂如β巯基乙醇的培养基培养小鼠骨髓瘤细胞,再用含有高浓度无机钠盐的培养基对小鼠骨髓瘤细胞进行预处理以调整其表面电荷;同时用含有IL‑6和IL‑2的培养基预培养脾细胞;最后将小鼠骨髓瘤细胞与脾细胞进行融合。本发明通过特定的培养基组合,分别对小鼠骨髓瘤细胞以及脾细胞进行前期处理,成功解决了细胞融合率低的问题,显著提高了融合效率,有利于缩短研发周期和节约研发成本。
主权项:1.一种杂交瘤细胞高效融合的方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、用培养基A培养小鼠骨髓瘤细胞后,再用培养基B对小鼠骨髓瘤细胞进行预处理以调整其表面电荷;其中,所述培养基A中含有用于中和氧自由基的还原剂,所述培养基B以10-20%vv胎牛血清+80-90%vvDMEM为基础培养基,外加终浓度为0.8-1.2%wt的谷氨酰胺和6000-9000mgL的无机钠盐,所述培养基B中含有300-400mgL的无机钾盐;S2、用含有IL-6和IL-2的培养基C预培养小鼠脾细胞;S3、将S1所得小鼠骨髓瘤细胞与S2所得小鼠脾细胞融合。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 武汉华美生物工程有限公司 一种杂交瘤细胞高效融合的方法
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