申请/专利权人：深圳沃德生命科技有限公司

申请日：2023-11-10

公开（公告）日：2024-03-22

公开（公告）号：CN117736462A

主分类号：C08H1/00

分类号：C08H1/00;C07K1/22;C07K1/14;C07K1/34;C07K14/47;G01N33/82;G01N33/68

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.09#实质审查的生效;2024.03.22#公开

摘要：本发明公开了一种叶酸‑γ‑氨基丁酸‑牛血清白蛋白偶联物的制备方法以及提取叶酸结合蛋白的方法和应用，属于体外诊断试剂技术领域。本发明提供的FA‑GABA‑BSA偶联物能够通过亲和层析的方法从乳清蛋白粉中提取叶酸结合蛋白，大大缩减了叶酸结合蛋白的成本；由其提取得到的叶酸结合蛋白特异性好、纯度高，可作为叶酸检测试剂盒的关键原料。本发明提供的提取叶酸结合蛋白的方法以乳清蛋白粉为原料，利用FA‑GABA‑BSA‑4B琼脂糖珠通过亲和层析柱进行提取，制备工艺简单，耗时短，具有良好的工业化应用价值。

主权项：1.一种叶酸-γ-氨基丁酸-牛血清白蛋白偶联物的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：S1、将碳二亚胺溶于γ-氨基丁酸水溶液中，再加入牛血清白蛋白水溶液，混匀后于22～28℃反应至少1h，得到γ-氨基丁酸-牛血清白蛋白复合物；所述γ-氨基丁酸、牛血清白蛋白和碳二亚胺的质量比为1：0.6～0.8：0.4～0.7；S2、以硼酸盐缓冲液清洗并溶解所述γ-氨基丁酸-牛血清白蛋白复合物，得到γ-氨基丁酸-牛血清白蛋白复合物的硼酸盐缓冲液溶液；S3、向叶酸的硼酸盐缓冲液溶液中加入N-羟基磺基琥珀酰亚胺和碳二亚胺，混匀后在室温下避光反应至少1h，离心，取上清，得活化后的叶酸溶液；所述叶酸、N-羟基磺基琥珀酰亚胺和碳二亚胺的摩尔比为0.5～1.0:0.5～1.5:0.1～1.0；S4、将所述活化后的叶酸溶液加入所述γ-氨基丁酸-牛血清白蛋白复合物的硼酸盐缓冲液溶液中，在室温下避光反应至少1h，然后于2～8℃反应至少8h；反应完成后用碳酸盐缓冲液清洗反应产物，得所述叶酸-γ-氨基丁酸-牛血清白蛋白偶联物。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 深圳沃德生命科技有限公司 叶酸-γ-氨基丁酸-牛血清白蛋白偶联物的制备方法以及提取叶酸结合蛋白的方法和应用

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