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【发明授权】一种荷花快繁体系的构建方法_南京农业大学三亚研究院;南京农业大学_202410014237.9 

申请/专利权人:南京农业大学三亚研究院;南京农业大学

申请日:2024-01-05

公开(公告)日:2024-03-22

公开(公告)号:CN117502246B

主分类号:A01H4/00

分类号:A01H4/00

优先权:

专利状态码:有效-授权

法律状态:2024.03.22#授权;2024.02.27#实质审查的生效;2024.02.06#公开

摘要:本发明公开了一种荷花快繁体系的构建方法,具体步骤包括:成熟胚表面灭菌、初代苗培养、走茎增殖、不定芽诱导与增殖、继代培养、驯化移栽。本发明以荷花成熟种子为外植体,取材方便,污染率低,走茎增殖快速,增殖效果好,可用于快繁生产与种质资源保存,为荷花的组织培养技术建立基础。

主权项:1.一种荷花快繁体系的构建方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:(1)灭菌:选取饱满的带壳莲子消毒灭菌备用;(2)初代无菌苗的培养:取出莲心,先将莲心在无菌水中浸泡,然后接入不含激素的MS空白培养基中培养直至莲心出苗,获得初代无菌苗;(3)走茎增殖:将步骤(2)得到的初代无菌苗接种到走茎增殖培养基上培养,直至获得带芽的无菌苗走茎;(4)走茎茎段诱导不定芽:将步骤(3)得到的无菌苗走茎切割为若干个含有2-3个生长点的走茎茎段,将切割好的走茎茎段接到继代培养基上培养,直至走茎茎段的生长点中诱导出不定芽和叶片,获得小苗;(5)继代培养:从步骤(4)得到的小苗中筛选具有3个以上的生长健壮、无畸形的不定芽的小苗,转移接种至新的继代培养基中增殖培养,直至小苗长出根后取出小苗进行组培苗的炼苗驯化,获得组培苗;(6)组培苗的炼苗与移栽:从步骤(5)得到的组培苗中筛选健康强壮的苗进行炼苗,移栽;步骤(1)所述灭菌为用75%的酒精、3%次氯酸钠消毒灭菌;步骤(2)莲心在无菌水中浸泡时间为6-8h;在不含激素的MS空白培养基中培养时间为15-20天;步骤(2)培养条件为每天光照时间为14-16小时,光照强度控制在1500-2500Lx,温度控制在25-28℃;步骤(3)培养条件为每天光照时间为14-16小时,光照强度控制在1500-2500Lx,温度控制在25-28℃;步骤(3)所述走茎增殖培养基配方为MS+6-BA0.5mgL+IBA1.5mgL+NAA0.5mgL+GA1mgL+蔗糖50gL,琼脂8gL,pH=5.6;步骤(4)与步骤(5)所述继代培养基为MS+6-BA1.5mgL+IBA1.2mgL+NAA0.6mgL,蔗糖浓度在40~60gL,琼脂8gL,pH=5.6;步骤(4)培养条件为每天光照时间为14-16小时,光照强度1500-2500Lx;步骤(6)所述炼苗条件为在23℃,1d内14-16小时光照,光照强度1600~2400lx的光照条件下先松开培养瓶盖敞开并加入无菌水培养24-36h,接着在室温和自然光照条件下开盖培养48h。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 南京农业大学三亚研究院;南京农业大学 一种荷花快繁体系的构建方法

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