申请/专利权人：河北省洪崖山国有林场(河北雄安新区白洋淀上游规模化林场)

申请日：2022-12-10

公开（公告）日：2024-03-26

公开（公告）号：CN115735774B

主分类号：A01H4/00

分类号：A01H4/00;A01G7/04

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.03.26#授权;2023.03.24#实质审查的生效;2023.03.07#公开

摘要：本发明提供一种蒙古栎的组织培养方法。一种蒙古栎的组织培养方法包括以下步骤：外植体的选择、外植体的灭菌处理、外植体的诱导培养、外植体的增殖培养、外植体的生根培养、无菌苗的炼苗驯化。本发明通过在外植体的灭菌处理中采用洗洁精浸泡、75％酒精擦拭、0.1％氯化汞消毒、无菌水冲洗等前期消毒手段，对外植体的灭菌效果更好，保证培养期间避免出现受污染、褐化、黄化等问题，提高蒙古栎的组织培养的效果。

主权项：1.一种蒙古栎的组织培养方法，其特征在于，包含如下步骤：S1：外植体的选择选取多年生健壮、无病虫害的蒙古栎，以其当年生、未木质化的枝条作为外植体母本，将作为外植体母本的枝条在室内进行水培至催生出新的嫩枝长出，取嫩枝作为外植体；S2：外植体的灭菌处理将上述步骤S1中的外植体除去叶片、叶柄，修剪成至少带一个腋芽或顶芽的茎段，茎段用洗洁精浸泡，流水冲洗，用75％酒精进行消毒，再冲洗，置于无菌吸水纸上吸去其表面多余水分，再切除茎段两端消毒死亡部分，得到无菌外植体；S3：外植体的诱导培养在MS基础培养基中添加0.5mgL的TDZ、0.5mgL的IBA、30gL的d-山梨醇、7gL琼脂、0.8mgL的硝酸银和60mgL的纳米硅配置诱导培养基，调节诱导培养基pH至5.8，将步骤S2中的无菌外植体形态学下端插入诱导培养基中进行芽的分化诱导培养，促进芽的萌发和生长，得到萌发和生长的蒙古栎腋芽；S4：外植体的增殖培养在MS基础培养基中添加0.1-1.0mgL的6-BA、0.1-1.0mgL的GA3、0.1-1.0mgL的NAA、7gL琼脂和30gL的d-山梨醇配置增殖培养基，调节增殖培养基pH至5.8，将步骤S3中的得到萌发和生长的蒙古栎腋芽整个接入增殖培养基进行增殖培养，得到蒙古栎幼苗；S5：外植体的生根培养在12MS基础培养基中添加0.1-1.0mgL的IBA、7gL琼脂、30gL的d-山梨醇和0.5-1.5gL的活性炭配置生根培养基，调节生根培养基pH至5.8，将步骤S4中的蒙古栎幼苗接入生根培养基进行生根培养，得到蒙古栎生根无菌幼苗；S6：无菌苗的炼苗驯化将步骤S5中的蒙古栎生根无菌幼苗从培养室移至温室大棚培养，然后移入轻基质中继续培育成完整的再生植株；所述步骤S3中的诱导培养期间，采用蓝光进行光照，S4中的增殖培养期间，采用远红光进行光照，S5中的生根培养期间，采用红光进行光照。

全文数据：

权利要求：

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