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【发明公布】基于蛋白质标签自组装的固定化羰基还原酶及连续催化制备阿瑞吡坦中间体的应用_浙江工业大学_202311806808.4 

申请/专利权人:浙江工业大学

申请日:2023-12-26

公开(公告)日:2024-03-29

公开(公告)号:CN117778341A

主分类号:C12N9/04

分类号:C12N9/04;C07K19/00;C12P7/22;C12M1/40;B01D15/14

优先权:

专利状态码:在审-实质审查的生效

法律状态:2024.04.16#实质审查的生效;2024.03.29#公开

摘要:本发明公开了一种基于蛋白质标签自组装的固定化羰基还原酶及连续催化制备阿瑞吡坦中间体的应用,所述固定化羰基还原酶是将融合羰基还原酶的基因工程菌经发酵培养获得的湿菌体超声破碎,破碎液经离心后所得沉淀用含0.5‑2%TritonX‑100的PB缓冲液洗涤,随后用PB缓冲液洗涤并重悬于PB缓冲液中,即为固定化羰基还原酶酶液。本发明通过将连续流催化与产物萃取偶联,实现了R‑3,5‑双三氟甲基苯乙醇的高效制备,在2molL的高底物浓度下进行不对称还原反应7h后,R‑BTPE产率达97%,ee值99.9%,同时,本发明的辅因子总周转率可达4816。

主权项:1.一种基于蛋白质标签自组装的固定化羰基还原酶,其特征在于,所述固定化羰基还原酶是将融合羰基还原酶的基因工程菌经发酵培养获得的湿菌体超声破碎,破碎液经离心后所得沉淀用含体积浓度0.5-2%TritonX-100的PB缓冲液洗涤,随后用PB缓冲液洗涤并重悬于PB缓冲液中,即为固定化羰基还原酶酶液;所述融合羰基还原酶是将源自雷弗松氏菌的SEQIDNO.2所示LXCAR-S154Y基因编码蛋白的N端通过连接肽与SEQIDNO.3所示CipA基因编码蛋白的C端连接构成。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 浙江工业大学 基于蛋白质标签自组装的固定化羰基还原酶及连续催化制备阿瑞吡坦中间体的应用

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