申请/专利权人：武汉楷拓生物科技有限公司;楷拓生物科技(苏州)有限公司;上海楷拓生物科技有限公司

申请日：2023-12-28

公开（公告）日：2024-03-29

公开（公告）号：CN117778379A

主分类号：C12N15/10

分类号：C12N15/10

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.16#实质审查的生效;2024.03.29#公开

摘要：本发明公开了一种清洁质粒纯化亲和填料的方法及其应用。1发酵罐扩大培养含目的质粒DNA的菌体，收集发酵完成的菌体；2释放质粒DNA，获得含质粒DNA的料液，依次使用第一过滤器和第二过滤器对所述料液进行过滤得到上清液；3使用含有置换缓存液的平板膜包或中空纤维浓缩质粒DNA；4液浓缩后进行凝胶层析，收集凝胶层析后的质粒；5对收集的质粒进行亲和层析，亲和层析后对亲和层析填料进行清洁验证，并检测清洁验证后填料中的质粒残留。本发明方法清洁效果显著，可以使不同批次间的质粒残留需要达到层析上样样品的10ppm以下，对填料的损伤较小，成本低。

主权项：1.一种清洁质粒纯化亲和填料的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：1发酵罐扩大培养含目的质粒DNA的菌体，收集发酵完成的菌体；2释放质粒DNA，获得含质粒DNA的料液，依次使用第一过滤器和第二过滤器对所述料液进行过滤得到上清液；3使用含有置换缓存液的平板膜包或中空纤维浓缩质粒DNA；4液浓缩后进行凝胶层析，收集凝胶层析后的质粒；5对收集的质粒进行亲和层析，亲和层析后对亲和层析填料进行清洁验证，并检测清洁验证后填料中的质粒残留；所述清洁验证包括清洁层析，所述清洁层析包括NaOH冲洗后28-30℃孵育。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 武汉楷拓生物科技有限公司;楷拓生物科技(苏州)有限公司;上海楷拓生物科技有限公司 一种清洁质粒纯化亲和填料的方法及其应用

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