申请/专利权人：杭州联川生物技术股份有限公司

申请日：2023-12-29

公开（公告）日：2024-03-29

公开（公告）号：CN117783542A

主分类号：G01N33/68

分类号：G01N33/68

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.16#实质审查的生效;2024.03.29#公开

摘要：本发明公开了一种粪便样本中蛋白质丰度的检测方法，包括如下步骤：取待检测样本置于破碎管中，破碎管中加入1粒大小3mm‑5mm的钢珠以及冰浴过的包含RIPA和PMSF的裂解液，冷冻研磨仪破碎，冰上裂解5‑20min，然后转移浑浊液至过滤柱纯化；利用蛋白质标准曲线测定纯化后的待测样本中蛋白质含量；测定后的待测样本采用蛋白稀释液稀释至0.5‑1mgmL，蛋白投入量为2‑20μL；取稀释后样本投入孵育反应液中，孵育18‑22h，加入延伸扩增液，PCR扩增，取扩增产物与检测反应液混合，最后加入到检测芯片中进行蛋白质丰度检测。该方法方便快捷，能在较短的时间内分离纯化粪便蛋白质，适用于Olink方法检测蛋白丰度，检测样本体积较少，检测通量高，可检测低丰度蛋白。

主权项：1.一种粪便样本中蛋白质丰度的检测方法，其特征在于，所述检测包括如下步骤：S1、粪便蛋白质提取：取待检测样本置于破碎管中，破碎管中加入1粒大小3mm-5mm的钢珠以及冰浴过的包含RIPA和PMSF的裂解液，冷冻研磨仪破碎，冰上裂解5-20min，然后转移浑浊液至过滤柱纯化；S2、蛋白定量和稀释：利用蛋白质标准曲线测定S1中纯化后的待测样本中蛋白质含量；测定后的待测样本采用蛋白稀释液稀释至0.5-1mgmL，蛋白投入量为2-20μL；S3、Olink蛋白相对丰度检测：取S2中稀释样本投入孵育反应液中，孵育18-22h，加入延伸扩增液，PCR扩增，取扩增产物与检测反应液混合，最后加入到检测芯片中进行蛋白质丰度检测。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 杭州联川生物技术股份有限公司 一种粪便样本中蛋白质丰度的检测方法

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