申请/专利权人：广东唯泰生物科技有限公司

申请日：2023-12-28

公开（公告）日：2024-03-29

公开（公告）号：CN117778314A

主分类号：C12N5/078

分类号：C12N5/078;C12N5/0789;C12N5/0783

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.16#实质审查的生效;2024.03.29#公开

摘要：本发明公开了一种胎盘来源有核细胞的分离方法，涉及细胞分离技术领域。本发明胎盘来源有核细胞的分离方法，采用低体积涮洗法结合Accutase酶消化法进行，不仅操作简便，成本低，易于转化生产，而且能有效降低离心后的细胞损失，提高有核细胞的提取量，使有核细胞分离效果更佳。

主权项：1.一种胎盘来源有核细胞的分离方法，其特征在于，包括如下步骤：1将胎盘小叶组织浸泡于200～300mL的抗凝缓冲液中进行第一次涮洗，并挤压残留在胎盘小叶组织里的血液，将第一次涮洗后的液体全部回收至离心瓶中；2将胎盘小叶组织进行破碎，采用200～300mL的抗凝缓冲液将破碎后的胎盘小叶组织进行第二次涮洗，将第二次涮洗后的滤液回收至步骤1的离心瓶中；3向第二次涮洗后的胎盘小叶组织中加入Accutase酶消化液，进酶消化处理，过滤，得到单细胞悬液；4将步骤2处理后离心瓶中回收的细胞悬液和步骤3得到的单细胞悬液混合后，进行离心处理，吸弃上清液；5向步骤4离心处理后的细胞沉淀中加入生理盐水进行稀释，得到细胞悬液，向细胞悬液中加入淋巴细胞分离液后，进行离心处理；6离心处理后，吸取离心管中部的白膜层细胞，将白膜层细胞依次进行洗涤和离心，弃去上清液，下层细胞用生理盐水重悬，得到有核细胞悬液；7将有核细胞悬液用冻存液冻存。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 广东唯泰生物科技有限公司 一种胎盘来源有核细胞的分离方法

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