申请/专利权人：南京乐韬生物科技有限公司

申请日：2023-12-29

公开（公告）日：2024-04-02

公开（公告）号：CN117802073A

主分类号：C12N9/54

分类号：C12N9/54

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.19#实质审查的生效;2024.04.02#公开

摘要：本发明公开了一种Kex2蛋白酶的纯化方法，采用阳离子交换色谱层析柱进行纯化，所述层析柱以阳离子交换介质作为固定相填料，包括如下具体步骤：1平衡步骤：用pH为4.0‑6.0且含有EDTA和任意一种选自PBS、NaAc或HAc的缓冲液冲洗层析柱至基线平；2上样步骤：将Kex2蛋白酶粗品上样至层析柱；3洗杂步骤：用pH为4.0‑6.0且含有EDTA和任意一种选自PBS、NaAc或HAc的缓冲液冲洗层析柱至基线平；4洗脱步骤：用pH为6.0‑9.0且含有EDTA、任意一种选自NaCl或Na2SO4无机盐溶液和任意一种选自PBS、NaAc或HAc的缓冲液进行洗脱，收集洗脱液。本发明的纯化方法得到的Kex2蛋白酶产品的纯度达到87.9％以上，酶活力达到23.4Umg，总回收率达到75.8％以上，从而可降低酶的使用成本，更适合工业化生产。

主权项：1.一种Kex2蛋白酶的纯化方法，其特征在于，采用阳离子交换色谱层析柱进行纯化，所述层析柱采用阳离子交换介质作为固定相填料，包括如下具体步骤：1平衡步骤：用pH为4.0-6.0且含有EDTA和任意一种选自PBS、NaAc或HAc的缓冲液冲洗层析柱至基线平；2上样步骤：将Kex2蛋白酶粗品上样至层析柱；3洗杂步骤：用pH为4.0-6.0且含有EDTA和任意一种选自PBS、NaAc或HAc的缓冲液冲洗层析柱至基线平；4洗脱步骤：用pH为6.0-9.0且含有EDTA、任意一种选自NaCl或Na2SO4的无机盐溶液和任意一种选自PBS、NaAc或HAc的缓冲液进行洗脱，收集洗脱液。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 南京乐韬生物科技有限公司 一种Kex2蛋白酶的纯化方法

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