申请/专利权人：复旦大学

申请日：2023-01-06

公开（公告）日：2024-04-02

公开（公告）号：CN117802200A

主分类号：C12Q1/6806

分类号：C12Q1/6806;C12Q1/6869

优先权：["20220930 CN 2022112127826"]

专利状态码：在审-公开

法律状态：2024.04.02#公开

摘要：本发明公开了一种游离DNA的应用分离回收方法，步骤包括：1cfDNA加长；2单链特异线性富集；3亲和素修饰的非磁性微球结合反应。本发明还公开了一种基因甲基化检测方法，步骤包括：1cfDNA加长；2重亚硫酸盐处理；3线性放大；4单链特异线性靶标富集，亲和素修饰的非磁性微球结合反应；5单分子标记反应；6单端特异增强指数扩增；7双端非特异指数扩增。本发明还公开了用于上述方法的试剂盒和基因甲基化检测方法的用途。本发明通过加长原始DNA模板减少DNA损失、线性放大补偿重亚硫酸盐处理造成的DNA损失、单分子标记去除非靶标DNA的竞争干扰，提高了甲基化测序的灵敏度和特异性。

主权项：1.微量游离DNA的分离回收方法，其特征在于，步骤包括：1在提取检测样本的cfDNA后，对cfDNA片段进行加长；2以步骤1加长后的cfDNA为模板，使用与目标靶区互补的生物素修饰的单端特异引物，进行单链特异线性富集反应；3将步骤2的产物与亲和素修饰的非磁性微球进行结合反应，分离并分别回收微球结合产物和未与微球结合的cfDNA。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 复旦大学 游离DNA分离回收及基因甲基化检测方法

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