申请/专利权人：北京银丰鼎诚生物工程技术有限公司;银丰生物工程集团有限公司

申请日：2023-12-30

公开（公告）日：2024-04-02

公开（公告）号：CN117802049A

主分类号：C12N5/10

分类号：C12N5/10;C12N5/0797;C12N15/62;C12N15/86;C12R1/91

优先权：

专利状态码：在审-公开

法律状态：2024.04.02#公开

摘要：本发明公开了一种可逆永生化人源神经干细胞系的制备方法，包括以下步骤：1构建含有目的基因的重组病毒载体，得到含永生化融合基因的病毒；所述目的基因为c‑Myc基因、linker和ESR1羧基端截短体突变体基因的融合基因；所述ESR1羧基端截短体突变体为G521R单点突变体或G400VM543AL544A三点突变体；2利用病毒转导和筛选构建可逆永生化人神经干细胞系，通过添加或去除雌激素受体调节剂来诱导细胞永生化与去永生化。本发明所获得的永生化神经干细胞在体外培养中能自我更新和无限扩增，治疗基因易在细胞内稳定表达，并仍然具有多潜能特征。本发明对神经干细胞的研究具有重要意义。

主权项：1.一种可逆永生化人源神经干细胞系的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1构建含永生化融合基因的病毒：构建含有目的基因的重组病毒载体，转染，得到含永生化融合基因的病毒；所述重组病毒载体上还含有标记基因和或筛选基因；所述目的基因为c-Myc基因、linker和ESR1羧基端截短体突变体基因的融合基因；所述c-Myc基因的核苷酸序列如SEQIDNo.1所示；所述linker的核苷酸序列如SEQIDNo.2所示；所述ESR1羧基端截短体突变体为G521R单点突变体，核苷酸序列如SEQIDNo.4所示，或为G400VM543AL544A三点突变体，核苷酸序列如SEQIDNo.5所示；2构建可逆永生化人源神经干细胞系：利用病毒转导和筛选构建可逆永生化人神经干细胞系，通过添加或去除雌激素受体调节剂来诱导细胞永生化与去永生化。

全文数据：

权利要求：

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