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【发明授权】一种水包油型碘化油纳米乳佐剂的制备方法及其应用_厦门大学_202111220206.1 

申请/专利权人:厦门大学

申请日:2021-10-20

公开(公告)日:2024-04-02

公开(公告)号:CN113952449B

主分类号:A61K39/39

分类号:A61K39/39;A61K39/00;A61K47/54;A61P35/00

优先权:

专利状态码:有效-授权

法律状态:2024.04.02#授权;2022.02.15#实质审查的生效;2022.01.21#公开

摘要:本发明公开了一种水包油型碘化油纳米乳佐剂的制备方法及其应用,包括如下步骤:1将Tween‑80与超纯水混合均匀后加热;2将卵磷脂溶于无水乙醇中,逐滴加入其中,获得水相;3取碘油作为油相,逐滴加入水相中;4进行超声处理,获得乳剂;5将乳剂离心处理若干次;6使用过滤膜过滤步骤5所得的物料,即得。发明制得的水包油型碘化油纳米乳佐剂在作为佐剂的同时也可作为一种肿瘤特异性抗原负载平台,系统地将佐剂与肿瘤特异性抗原联合使用,克服了单纯肿瘤特异性抗原免疫原性低而造成对机体免疫反应激活不足的问题。

主权项:1.一种肿瘤纳米疫苗制剂,其特征在于:由胆固醇修饰的肿瘤特异性抗原OVA水溶液与水包油型碘化油纳米乳佐剂混合制备而成,其中,该肿瘤纳米疫苗制剂所含的肿瘤特异性抗原浓度为100-600μgmL,该胆固醇修饰的方法为:将200μl的DMSO和15μl的DIEA、5mg的OVA、3mg的干燥的胆固醇混合,4℃搅拌反应混合12h,反应完成后,在真空中去除溶剂,用CHCl3进行研磨而成;其制备方法包括:(1)胆固醇修饰的肿瘤特异性抗原OVA水溶液与所述水包油型碘化油纳米乳佐剂以1:0.1-5的体积比混合,在4℃环境下,磁力搅拌12h;(2)将步骤(1)所得的物料装入100KD的透析袋中,在4℃环境下,用2L的PBS溶液透析48h;(3)收集透析袋中物料,使用0.22μm无菌过滤膜过滤,即得;上述水包油型碘化油纳米乳佐剂的制备方法包括如下步骤:(1)将Tween-80与超纯水混合均匀后加热至70-100℃,Tween-80与超纯水的比例为180-250μL:18-20mL;(2)将卵磷脂溶于无水乙醇中获得卵磷脂乙醇溶液,然后在700-800rpm的搅拌速度下,将卵磷脂乙醇溶液逐滴加入到温度为70-100℃的步骤(1)所得的物料中,获得水相,卵磷脂与无水乙醇的比例为100-120mg:220-260μL;(3)取碘油作为油相,在700-800rpm的搅拌速度下将碘油逐滴加入到温度为70-100℃的步骤(2)所得的水相中,直至物料体积变为8-12mL,碘油、Tween-80和卵磷脂的比例为500μL:180-250μL:100-120mg;(4)将步骤(3)所得的物料于2-4℃进行超声处理,获得乳剂;(5)将步骤(4)所得的乳剂转移至90-110KD的超滤离心管中,于3000-4000rpm离心处理若干次,每次15-20min,收集超滤离心管中的超滤膜所截留的物料;(6)使用孔径为0.2-0.3μm过滤膜过滤步骤(5)所得的物料,即得。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 厦门大学 一种水包油型碘化油纳米乳佐剂的制备方法及其应用

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