申请/专利权人:汕头大学医学院
申请日:2020-12-25
公开(公告)日:2024-04-02
公开(公告)号:CN112553145B
主分类号:C12N5/073
分类号:C12N5/073;C12N5/0735;C12N5/071
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2024.04.02#授权;2021.04.13#实质审查的生效;2021.03.26#公开
摘要:本发明属于生物技术领域,具体涉及一种高效定型内胚层细胞的诱导分化方法,包括如下步骤:A、在干细胞中添加TGF‑β激活剂、GSK‑3抑制剂、mTOR抑制剂进行诱导分化,在第一阶段培养基中培养;B、添加TGF‑β的激活剂和BMPI型受体抑制剂诱导分化,在所述第一阶段培养基中完成定型内胚层细胞阶段。本发明解决现有分化方法存在的分化成本高、分化质量低、分化不彻底、分化效率不高和分化后获得的定型内胚层细胞不够纯净等问题。
主权项:1.一种高效定型内胚层细胞的诱导分化方法,其特征在于,包括如下步骤:A、Day0,在干细胞中添加ActivinA、CHIR99021、Torin2进行诱导分化,在第一阶段培养基中培养,ActivinA的使用浓度为20ngml,CHIR99021为3μM,Torin2为15nM;B、Day1,添加ActivinA和LDN193189DM3189诱导分化,ActivinA的使用浓度为20ngml,LDN193189DM3189为250nM,在所述第一阶段培养基中历时2天完成定型内胚层细胞阶段;完成定型内胚层细胞阶段后,进一步诱导分化为肝样细胞;所述第一阶段培养基为添加了青-链霉素双抗以及B-27的RPMI1640培养基。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 汕头大学医学院 一种高效定型内胚层细胞的诱导分化方法
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