申请/专利权人：上海海洋大学

申请日：2022-08-09

公开（公告）日：2024-04-02

公开（公告）号：CN115308078B

主分类号：G01N5/04

分类号：G01N5/04;G01N30/02;G01N1/40;G01N1/42

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.04.02#授权;2022.11.25#实质审查的生效;2022.11.08#公开

摘要：本发明公开了一种柔鱼类不同组织脂肪酸质量分数的测定方法，属于生物化学检测领域。该测定方法包括采集柔鱼类胴体肌肉、消化腺和性腺组织鲜样冷冻保存，分别冷冻干燥至恒重，研磨粉碎，用组织脂肪索氏萃取法对上述肌肉、消化腺和性腺组织样品中脂肪分两个阶段萃取，得出不同组织的脂肪酸质量分数，根据脂肪萃取用的样品干燥重量以及脂肪酸脂肪占比，得出每个组织脂肪酸脂肪所对应的样品干燥重量，根据测定的脂肪酸浓度得到每个组织的脂肪酸质量分数，解决柔鱼类不同组织脂肪萃取时间差异而导致的组织脂肪萃取不完全以及组织脂肪萃取过程中被氧化等问题，可应用于海洋生态学和繁殖生物生态学等领域开展脂肪酸生物标志物的测定与分析。

主权项：1.一种柔鱼类不同组织脂肪酸质量分数的测定方法，其特征在于，该测定方法包括以下步骤：步骤1、采集柔鱼类胴体肌肉组织、消化腺组织和性腺组织的鲜样各5.00g；步骤2、肌肉组织、消化腺组织和性腺组织的鲜样零下80℃冷冻保存24–36小时，分别置入冷冻干燥机冷冻干燥至恒重；步骤3、称量肌肉组织、消化腺组织和性腺组织的干燥样品重量，研磨粉碎，每个组织称取0.3–0.5g干燥的粉碎样品，精确到±0.1mg；步骤4、使用组织脂肪索氏萃取法对上述肌肉组织、消化腺组织和性腺组织样品中脂肪进行两个阶段萃取：第一个阶段：分别萃取肌肉、消化腺和性腺样品组织的部分脂肪含量，萃取时间均为30分钟，萃取得到的部分脂肪物质经旋转蒸发、氮吹至恒重，记录脂肪含量，精确到±0.1mg；随后组织脂肪直接用于脂肪酸甲酯化，置入气相色谱-质谱联用仪的脂肪酸测样瓶，GC-MS测定每个组织的脂肪酸浓度，单位为mgmL；第二个阶段：对已经萃取部分脂肪含量后的组织样品继续使用组织脂肪索氏萃取法进行组织脂肪完全脱脂，完全脱脂后的组织样品置入干燥烘箱干燥至恒重，称量此时的组织样品干重，根据肌肉、消化腺和性腺样品组织脱脂前和脱脂后的干重，得出每个组织的脂肪含量，精确到±0.1mg；步骤5、根据上述步骤中肌肉、消化腺、性腺组织的脂肪含量，以及用于脂肪酸测定的脂肪酸脂肪含量，得出脂肪酸脂肪含量占脂肪含量的百分比，单位％；步骤6、根据脂肪萃取用的肌肉、消化腺、性腺组织样品干燥重量以及上述脂肪酸脂肪含量占比，得出每个组织脂肪酸脂肪含量所对应的样品干燥重量，单位mg；步骤7、根据测定的肌肉、消化腺、性腺组织的脂肪酸浓度，得到每个组织的脂肪酸质量分数，公式为： 式中，Fa为组织的脂肪酸质量分数，单位为mgmg；c为GC-MS测定的脂肪酸浓度，单位为mgmL；hv为组织脂肪酸甲酯化时加入的正己烷体积，单位为mL；sw为脂肪酸脂肪含量所对应的样品干燥重量，单位为mg；k为肌肉、消化腺、或性腺组织；i为GC-MS测定的每个单体脂肪酸。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 上海海洋大学 一种柔鱼类不同组织脂肪酸质量分数的测定方法

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