申请/专利权人：深圳华大智造科技股份有限公司

申请日：2019-06-26

公开（公告）日：2024-04-09

公开（公告）号：CN113811620B

主分类号：C12Q1/6869

分类号：C12Q1/6869;C12Q1/6844

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.04.09#授权;2022.01.04#实质审查的生效;2021.12.17#公开

摘要：一种巢式多重PCR高通量测序文库制备方法及试剂盒，巢式多重PCR高通量测序文库制备方法包括：使用正向引物和反向引物对目标区域进行扩增，正向引物是正向特异性序列，反向引物包括3’端的反向特异性序列和5’端的第一通用测序序列；对第一轮PCR扩增的产物进行纯化；使用巢式引物、第一标签引物和第二通用引物对纯化后的产物进行扩增，其中巢式引物位于正向引物的下游，巢式引物包括5’端的第二通用测序序列和3’端的特异性序列，第一标签引物3’端序列和反向引物5’端的部分或全部序列相同，且第一标签引物还包括第一标签序列，第二通用引物3’端序列和巢式引物5’端的部分或者全部序列相同。巢式多重PCR高通量测序文库制备方法能够有效避免多重PCR扩增过程中产生的二聚体，并且采用巢式扩增方法大大增加PCR扩增的特异性。

主权项：1.一种巢式多重PCR高通量测序文库制备方法，其特征在于，所述方法包括：第一轮PCR扩增：使用正向引物和反向引物对目标区域进行扩增，其中所述正向引物是与所述目标区域结合的正向特异性序列，所述反向引物包括3’端的与所述目标区域结合的反向特异性序列和5’端的第一通用测序序列；扩增产物的纯化：对所述第一轮PCR扩增的产物进行纯化；第二轮PCR扩增：使用巢式引物、第一标签引物和第二通用引物对纯化后的产物进行扩增，其中所述巢式引物位于所述正向引物的下游，所述巢式引物包括5’端的第二通用测序序列和3’端的特异性序列，所述第一标签引物3’端序列和所述反向引物5’端的第一通用测序序列部分或全部序列相同，且所述第一标签引物还包括第一标签序列，所述第二通用引物3’端序列和所述巢式引物5’端的第二通用测序序列部分或者全部序列相同。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 深圳华大智造科技股份有限公司 巢式多重PCR高通量测序文库制备方法及试剂盒

免责声明
1、本报告根据公开、合法渠道获得相关数据和信息，力求客观、公正，但并不保证数据的最终完整性和准确性。
2、报告中的分析和结论仅反映本公司于发布本报告当日的职业理解，仅供参考使用，不能作为本公司承担任何法律责任的依据或者凭证。

阅读全文 双屏查看 官方信息 专利公告 收藏专利 下载PDF 下载WORD