申请/专利权人：广州迈景基因医学科技有限公司

申请日：2021-11-22

公开（公告）日：2024-04-16

公开（公告）号：CN113981043B

主分类号：C12Q1/6811

分类号：C12Q1/6811;C12Q1/6869

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.04.16#授权;2022.02.18#实质审查的生效;2022.01.28#公开

摘要：本发明属于测序技术领域，具体涉及一种制备二代测序接头的方法，本发明提供了一种制备二代测序接头的方法，该方法中的接头由酶切消化产生，相比于合成方法制备的接头，将产生更多有效的5’端磷酸基团，可以提高接头的链接效率；同时，本发明采用长模板退火，降低退火过程中简并碱基与其它固定序列分子内或分子间的结合，提高接头生成效率；此外，退火后直接消化，避免了其它方法中如酶学方法由于在链延伸步骤因为效率问题而导致的接头生成效率降低。可见，本发明采用酶切消化的方法制备接头，不仅制备过程更为简洁，而且产生有效接头的效率更高。

主权项：1.一种制备二代测序接头的方法，其特征在于，根据测序平台选择两条可互补序列，所述可互补序列由接头序列，限制性酶切位点序列和用于增加退火温度的序列组成，两条可互补序列的长度均大于16bp，先对两条可互补序列进行退火处理，然后使用能产生T凸出或平末端的限制性内切酶进行酶切消化，消化后对接头进行纯化即得二代测序接头；所述接头序列包含双端index,或单端index；用于增加退火温度的序列长度大于1bp，小于50bp，GC含量大于40％；所述限制性内切酶包括XcmI，AhdI,BCiVI,BmrI,Fnu4HI,HphI,Hpy188I,MboII,MnlI，BsaBI；所述纯化方法为链霉亲和素磁珠吸附法。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 广州迈景基因医学科技有限公司 一种制备二代测序接头的方法

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