申请/专利权人：南京师范大学

申请日：2022-01-27

公开（公告）日：2024-04-09

公开（公告）号：CN114540273B

主分类号：C12N5/071

分类号：C12N5/071;C12N5/0775;C12N5/09

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.04.09#授权;2022.06.14#实质审查的生效;2022.05.27#公开

摘要：本发明涉及生物医学领域，具体涉及一种诱导间充质干细胞向胰岛β细胞分化的方法。本发明提供的方法，包括预诱导和正式诱导，所述方法通过获得特定的细胞外囊泡EV，可以实现微囊泡MV诱导间充质干细胞MSC出现胰岛样细胞形态学变化。具体地，本发明提供的诱导方法，使得MV在胰岛β细胞诱导分化中起主导作用。本发明提供的诱导方法，是一种EV介导的细胞间通讯真正用于干细胞诱导分化领域的新方式。本发明所述诱导方法的诱导效率非常高，有望将体外诱导的胰岛β细胞应用于临床。

主权项：1.一种诱导间充质干细胞分化为胰岛β细胞的方法，其特征在于，所述方法包括：预诱导和正式诱导；所述预诱导中微囊泡MV工作浓度为35-40μgmL，烟酰胺工作浓度为5mM，胰岛素转铁蛋白-硒ITS工作浓度为0.5％；所述正式诱导中，微囊泡MV工作浓度为70-80μgmL，烟酰胺工作浓度为5-10mM，胰岛素转铁蛋白-硒ITS工作浓度为0.5-1％；干细胞培养体系中，采用无细胞外囊泡EV的血清；所述微囊泡MV来源于大鼠胰岛素瘤细胞，所述微囊泡MV的获得，包括：培养大鼠胰岛素瘤细胞，每36-48h收集一次培养基，300-2000g离心去除死细胞和细胞碎片，12000g超速离心去除上清获得沉淀，用PBS重悬沉淀，将沉淀定量到150-190μgmL，4℃保存备用。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 南京师范大学 一种诱导间充质干细胞向胰岛β细胞分化的方法

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