申请/专利权人：昆明理工大学

申请日：2024-01-19

公开（公告）日：2024-04-16

公开（公告）号：CN117887799A

主分类号：C12Q1/02

分类号：C12Q1/02;G01N21/64

优先权：

专利状态码：在审-公开

法律状态：2024.04.16#公开

摘要：本发明涉及一种评估化合物对胰岛β细胞潜在毒性效应的方法，属于人体健康风险评价技术领域；本发明包括Q1：细胞培养；Q2：装载荧光探针；Q3：药物暴露；Q4：细胞活性氧水平检测；Q5：判断待测化合物是否对胰岛β细胞存在潜在毒性效应；Q6：细胞凋亡检测。本发明通过特异性好、操作简单、成本较低的高通量检测方法检测细胞内活性氧水平，并通过细胞凋亡检测确定不同化合物对胰岛β细胞的潜在毒性大小，以获取更加全面的评估数据，为人体健康风险评价提供更加全面以及可靠的数据。

主权项：1.一种评估化合物对胰岛β细胞潜在毒性效应的方法，其特征在于：通过检测化合物暴露后胰岛素瘤胰岛β细胞内活性氧水平的变化以及细胞活性，在细胞水平评估化合物对胰岛β细胞的潜在毒性效应，所述方法包括以下步骤：Q1：细胞培养：将胰岛素瘤胰岛β细胞种板到96孔板中，并进行细胞培养；Q2：装载荧光探针：使用细胞培养液配制荧光探针，去除96孔板中原有细胞培养液后加入荧光探针，进行孵育使荧光探针进入细胞；Q3：药物暴露：使用细胞培养液配制待测化合物，去除96孔板中原有荧光探针溶液，加入缓冲液进行细胞清洗，然后向96孔板的不同孔中分别加入待测化合物以及空白对照的细胞培养液，进行细胞培养；Q4：细胞活性氧水平检测：测定所述步骤Q3中经培养后的细胞的荧光强度；Q5：判断待测化合物是否对胰岛β细胞存在潜在毒性效应：将加入待测化合物进行培养的细胞的荧光强度与加入空白对照的细胞培养液进行培养的细胞的荧光强度进行比较，判断待测化合物是否对胰岛β细胞存在潜在毒性效应；Q6：细胞凋亡检测：将胰岛素瘤胰岛β细胞种板到6孔板中进行细胞培养，之后向6孔板的不同孔加入经所述步骤Q5判断后对胰岛β细胞存在潜在毒性效应的待测化合物以及空白对照的细胞培养液进行细胞培养，然后对细胞进行洗涤染色后，分析凋亡细胞在细胞中占比，通过比较加入待测化合物进行培养的细胞与加入空白对照的细胞培养液进行培养的细胞，判断待测化合物对细胞活性产生的影响。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 昆明理工大学 一种评估化合物对胰岛β细胞潜在毒性效应的方法

免责声明
1、本报告根据公开、合法渠道获得相关数据和信息，力求客观、公正，但并不保证数据的最终完整性和准确性。
2、报告中的分析和结论仅反映本公司于发布本报告当日的职业理解，仅供参考使用，不能作为本公司承担任何法律责任的依据或者凭证。

阅读全文 双屏查看 官方信息 专利公告 收藏专利 下载PDF 下载WORD