申请/专利权人：国药(武汉)精准医疗科技有限公司;国药(武汉)医学实验室有限公司;国药集团基因科技有限公司

申请日：2024-01-02

公开（公告）日：2024-04-05

公开（公告）号：CN117821566A

主分类号：C12Q1/6806

分类号：C12Q1/6806;C12Q1/6886;C40B50/06

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.23#实质审查的生效;2024.04.05#公开

摘要：本发明提供一种融合基因测序文库的制备方法及应用。该测序文库的制备方法包括如下步骤：获取组织样本，提取样本的RNA，逆转录生成cDNA，采用包埋UMI接头的Tn5酶进行酶切，酶切缺口补平，加入index引物进行PCR扩增，磁珠纯化回收后杂交，链霉亲和素磁珠纯化回收后再次PCR扩增，纯化回收即得。相比常规包括将RNA打断的文库构建方法，本发明融合基因测序文库的制备方法的实验流程简化且效率较高，同时对样本核酸投入量要求降低至1ng的RNA；相比较常规的Tn5转座酶建库，本方法由于给文库加上了UMI序列，有利于消除PCR扩增带来的错误率，使检测结果更精准。

主权项：1.一种测序文库的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：获取样本；提取所述样本中的RNA；逆转录生成cDNA；将带UMI标签序列的接头包埋在Tn5酶上；采用带包埋接头的Tn5酶进行酶切；酶切缺口补平；加入index引物进行PCR扩增，DNAcleanbeads磁珠纯化回收；采用探针panel杂交捕获，链霉亲和素磁珠纯化回收；再次PCR扩增，纯化回收，即得。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 国药(武汉)精准医疗科技有限公司;国药(武汉)医学实验室有限公司;国药集团基因科技有限公司 融合基因测序文库的制备方法及应用

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