申请/专利权人:中国热带农业科学院环境与植物保护研究所
申请日:2023-12-28
公开(公告)日:2024-04-05
公开(公告)号:CN117821606A
主分类号:C12Q1/6888
分类号:C12Q1/6888;C12Q1/686;C12N15/11
优先权:
专利状态码:在审-实质审查的生效
法律状态:2024.04.23#实质审查的生效;2024.04.05#公开
摘要:本发明公开了一种用于小巢粉虱、双钩巢粉虱和螺旋粉虱快速鉴定方法,属于分子生物技术领域,本发明针对小巢粉虱、双钩巢粉虱和螺旋粉虱三种形态比较相似且危害棕榈科植物的粉虱类害虫提供了一套快速鉴定的专用引物及其使用方法。本发明设计的三对特异性引物可以用来分别鉴定小巢粉虱、双钩巢粉虱和螺旋粉虱,其技术方案关键在于针对小巢粉虱、双钩巢粉虱和螺旋粉虱设计不同的特异性引物,将这些引物进行优化,使之能准确而快速地鉴别这三种粉虱类害虫,且将这三对特异性引物混合在一起,分别以小巢粉虱、双钩巢粉虱和螺旋粉虱的基因组DNA为模板进行PCR反应,也能鉴定出三种不同的粉虱类害虫。该操作简便快捷,具有广泛的适用性。
主权项:1.一种用于小巢粉虱、双钩巢粉虱和螺旋粉虱快速鉴定方法,其特征在于,包括以下步骤:1PCR扩增:用特异性引物PM-FGT-R、PP-FGT-R、AD-FGT-R中的一种或几种对粉虱样品DNA进行PCR扩增,得到PCR产物反应液;PM-F核苷酸序列:CGAGTTCGTTATCCTGTGT;GT-R核苷酸序列:CAAGGTTTCCGTAGGTGA;PP-F核苷酸序列:AAATACGATTCGAGTGTGTG;GT-R核苷酸序列:CAAGGTTTCCGTAGGTGA;AD-F核苷酸序列:GTTCGGGGTTATTCGTGTA;GT-R核苷酸序列:CAAGGTTTCCGTAGGTGA;2将步骤1所得的PCR产物反应液进行电泳分析;3根据电泳显示的PCR扩增片段的大小来判断粉虱种类,若有明显清晰的204bp的条带,则可判断为是小巢粉虱,若条带为426bp的为双钩巢粉虱,若条带为654bp的则为螺旋粉虱。
全文数据:
权利要求:
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