申请/专利权人：南京农业大学

申请日：2024-01-11

公开（公告）日：2024-04-12

公开（公告）号：CN117871501A

主分类号：G01N21/65

分类号：G01N21/65;G01N33/569;G01N33/543;C12Q1/24;G01N33/531;B22F1/054

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.30#实质审查的生效;2024.04.12#公开

摘要：本发明的免疫磁分离联合拉曼光谱特异性检测单增李斯特菌，利用链霉亲和素‑生物素介导偶联单增李斯特菌抗体制备免疫磁珠；将其与已知浓度的单增李斯特菌标准液混合、孵化后，得到磁珠食源性致病菌复合物，再加入纳米银颗粒增强基底进行表面增强拉曼检测，建立单增李斯特菌浓度‑拉曼强度标准曲线；将待测样品与磁珠、纳米银基底混合进行拉曼检测，所得拉曼强度与标准曲线进行对比，即可得出待测样品中单增李斯特菌的含量。其是一种捕获效率高、简便、分离时间短，从复杂基质中快速、特异分离目的菌单增李斯特菌的检测方法。相比于菌落计数方法，本发明的检测方法用时显著缩短，检测时间﹤3h；为致病菌检测指出了新的方向性。

主权项：1.免疫磁分离联合拉曼光谱特异性检测单增李斯特菌的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、应用链霉亲和素-生物素介导偶联单增李斯特菌抗体，制备免疫磁珠；S2、将培养至对数期的单增李斯特菌用水配制成浓度为10～107CFUmL的单增李斯特菌标准液，取相同体积各浓度的单增李斯特菌标准液分别与免疫磁珠进行特异性的捕获富集，得到对应的磁珠食源性致病菌复合物；S3、向磁珠食源性致病菌复合物中加入纳米银，得到磁珠食源性致病菌增强基底复合物；进行拉曼检测，以单增李斯特菌标准液的浓度为横坐标，拉曼信号强度为纵坐标，建立单增李斯特菌标准曲线；S4、将待测样品与免疫磁珠、纳米银混合均匀，干燥后，进行拉曼检测，将所得拉曼信号强度与标准曲线进行比对，可得待测样品中单增李斯特菌的含量。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 南京农业大学 免疫磁分离联合拉曼光谱特异性检测单增李斯特菌

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