申请/专利权人：中国环境科学研究院

申请日：2023-12-29

公开（公告）日：2024-04-12

公开（公告）号：CN117866877A

主分类号：C12N5/071

分类号：C12N5/071

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.30#实质审查的生效;2024.04.12#公开

摘要：本发明涉及生物医药技术领域，公开了一种体外肺泡或血管屏障3D细胞类器官模型的构建方法，通过本发明的方法构建的本3D细胞模型在不更换培养液的情况仍有较好的细胞存活率，为体外相较长的实验提供保障；可在一定程度上模拟肺泡‑血管屏障系统的工作状态；细胞立体分层培养，细胞间相互作用，分泌因子通过Transwell小孔相互影响，弥补一维、二维培养与动物模型之间的差距；且模型中所有细胞都是人源细胞系，避免了动物实验中动物与人的生理差异，弥补动物实验成本高、周期长的缺陷。

主权项：1.一种体外肺泡或血管屏障3D细胞类器官模型的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、分别获取BEAS-2B、THP-1和EA.hy926三种细胞样品；S2、培养前准备：水浴锅中加入无菌水并加热到37℃，将含有DMEM、PBS和胰酶的试剂在水浴锅中提前预热20-30分钟；用酒精仔细擦拭消毒细胞培养箱，底盘中加入无菌水，调节箱内为37℃、5％CO2、80-90％湿度；无菌操作台使用前将培养瓶、试剂盒，枪头，和枪头盒用酒精擦拭并放入无菌操作台，打开紫外20-30分钟；所有进入无菌操作台的耗材都需酒精擦拭消毒；S3、细胞3D培养前单细胞培养，具体包括以下步骤：1细胞复苏；2细胞传代：针对BEAS-2B和EA.hy926采用贴壁细胞传代，针对THP-1采用悬浮细胞传代；S4、利用Transwell模型构建3D细胞类器官模型，具体包括以下步骤：1将EA.hy926添加到Transwell插入物下层中；2将BEAS-2B添加到Transwell插入物上层中；3将THP-1加入Transwell插入物上层中；4培养24小时后，3D细胞类器官模型构建完成。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 中国环境科学研究院 一种体外肺泡或血管屏障3D细胞类器官模型的构建方法

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