申请/专利权人：河北农业大学

申请日：2023-11-03

公开（公告）日：2024-04-12

公开（公告）号：CN117866957A

主分类号：C12N15/113

分类号：C12N15/113;C12N15/80;C12N9/22;C12N1/15;C12R1/645

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.30#实质审查的生效;2024.04.12#公开

摘要：本发明公开了农杆菌介导的茄链格孢的基因编辑方法，属于基因工程技术领域。本发明提供了一种农杆菌介导的茄链格孢的CRISPRCas9基因编辑方法，并以茄链格孢黑色素基因AspksA为代表，建立可用于茄链格孢大规模基因敲除的CRISPRCas9基因编辑技术。AspksA编码的聚酮合酶是丝状真菌中DHN黑色素合成的必需的物质，以该基因作为敲除靶点设计sgRNA，通过对比发现农杆菌介导的基因编辑效率优于真菌自主复制元件AMA1质粒介导的基因编辑效率，并基于改进的CRISPRCas9基因编辑方法成功高效敲除黑色素基因AspksA，证明其在侵染中的作用。

主权项：1.一种农杆菌介导的茄链格孢的CRISPRCas9基因编辑方法，其特征在于，包括以下步骤：针对茄链格孢的目标基因设计sgRNA，将所述sgRNA连接到含T-DNA的递送质粒中作为重组递送质粒；以农杆菌介导的方法，将所述重组递送质粒转化至茄链格孢的分生孢子，利用筛选标记，分离出发生基因编辑的转化子。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 河北农业大学 农杆菌介导的茄链格孢的基因编辑方法

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