申请/专利权人：南京林业大学;江苏菁康生物科技有限公司

申请日：2021-08-31

公开（公告）日：2024-04-12

公开（公告）号：CN113718002B

主分类号：C12P19/04

分类号：C12P19/04;C12P19/14;C12N9/24;C12N9/40;C12R1/885

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.04.12#授权;2022.04.01#著录事项变更;2021.12.17#实质审查的生效;2021.11.30#公开

摘要：本申请公开了一种利用玉米芯碱抽提剩余物制备小分子半乳甘露聚糖和半乳甘露低聚糖的方法，以玉米芯碱抽提剩余物为碳源，以里氏木霉为产酶菌株，进行发酵产酶，获得酶液；直接利用该酶液对含半乳甘露聚糖的原料进行酶解，获得小分子半乳甘露聚糖和半乳甘露低聚糖。该酶液无需纯化即可直接水解半乳甘露聚糖制备小分子半乳甘露聚糖和半乳甘露低聚糖。从而实现对工业生产废弃物的再利用，提高其附加值，降低半乳甘露低聚糖的生产成本，具有非常好的应用前景。

主权项：1.一种利用玉米芯碱抽提剩余物制备小分子半乳甘露聚糖和半乳甘露低聚糖的方法，其特征在于，步骤如下：1取玉米芯，以1:20的固液比加入10％的氢氧化钠溶液混合，在100℃下抽提1小时，抽提结束后过滤，获得的固体残渣为玉米芯碱抽提剩余物，用蒸馏水对剩余物进行多次洗涤，回收洗涤水，浓缩后循环用于碱抽提玉米芯，获得的剩余物干燥备用；2以步骤1处理后的剩余物为碳源配置发酵培养基，按10％的接种量接入里氏木霉孢子，置于28～30℃、170转分的恒温摇床中培养4天，进行发酵产酶，获得酶液；其中，剩余物的浓度为15～30gL，所得酶液中β-甘露聚糖酶酶活力不低于1.5UmL，α-半乳糖苷酶活力不高于为0.06UmL，β-甘露糖苷酶活力不高于为0.03UmL；3取田菁种子，经机械粉碎至20～100目，按1∶50固液比加入蒸馏水，于50℃抽提24h后，于10000转分条件下离心10min获得上清液，并向上清液中加入无水乙醇，所得沉淀物经真空干燥得到半乳甘露聚糖粉状固体；直接利用步骤2制备的酶液对半乳甘露聚糖粉状固体进行酶解，底物浓度2％、酶加量20Ug半乳甘露聚糖、pH值4.8、50℃条件下反应24h；酶水解反应结束后，将酶水解物置于100℃下处理10min从而使酶失活，失活的酶解液于10000转分条件下离心10min，获得上清液，采用乙醇分级沉淀，即获得小分子半乳甘露聚糖和半乳甘露低聚糖，其中，半乳甘露低聚糖的分子量小于3000Da，小分子半乳甘露聚糖的分子量在3000到20000Da。

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