申请/专利权人：上海师范大学;上海吐露港生物科技有限公司;上海海关动植物与食品检验检疫技术中心

申请日：2024-02-28

公开（公告）日：2024-04-16

公开（公告）号：CN117887901A

主分类号：C12Q1/70

分类号：C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11;C12R1/93

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.05.03#实质审查的生效;2024.04.16#公开

摘要：本发明涉及一种结合CRISPRCas12a和RT‑LAMP的用于检测食源性甲肝病毒的一管式方法，具体步骤如下：S1、于反应管管内配置RT‑LAMP反应体系，将待测样本加入反应管管内，并于反应管内加装油封，于反应管管盖配置CRISPRCas12a体系，包括带有FAM荧光基团的ssDNA荧光探针；S2、反应管管底进行恒温扩增，得到扩增后的基因片段；S3、将管底扩增结束的RT‑LAMP反应体系与管盖的CRISPRCas12a体系混合；S4、采集混合后的反应管内的荧光信号强度，当反应管内荧光信号强度增加时，待测样本内含有甲肝病毒，当反应管内荧光信号强度未变时，待测样本内不含有甲肝病毒。

主权项：1.一种结合CRISPRCas12a和RT-LAMP的用于检测食源性甲肝病毒的一管式方法，其特征在于，具体步骤如下：S1、于反应管管内配置RT-LAMP反应体系，将待测样本加入反应管管内，并于反应管内加装油封，于反应管管盖配置CRISPRCas12a体系，所述CRISPRCas12a体系中包括带有FAM荧光基团的ssDNA荧光探针；S2、反应管管底进行恒温扩增，得到扩增后的基因片段，所述基因片段的核酸序列如SEQIDNO.6所示；S3、将管底扩增结束的RT-LAMP反应体系与管盖的CRISPRCas12a体系混合；S4、采集混合后的反应管内的荧光信号强度，当反应管内荧光信号强度增加时，待测样本内含有甲肝病毒，当反应管内荧光信号强度未变时，待测样本内不含有甲肝病毒。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 上海师范大学;上海吐露港生物科技有限公司;上海海关动植物与食品检验检疫技术中心 结合CRISPR/Cas12a和RT-LAMP的用于检测食源性甲肝病毒的一管式方法

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