申请/专利权人：中国科学院深圳先进技术研究院

申请日：2023-12-22

公开（公告）日：2024-04-19

公开（公告）号：CN117904159A

主分类号：C12N15/70

分类号：C12N15/70;C12N15/81;C12N15/31;C12N15/65;C12R1/19;C12R1/865

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.05.07#实质审查的生效;2024.04.19#公开

摘要：本发明公开了一种模块化正交的高效转录因子DNA结合结构域系统的构建方法,包括以下步骤:S1、选取模块化转录因子的基本架构及其调控启动子的基本架构；S2、在转录因子和调控启动子的基本架构基础上，构建含有致死基因CCDB的标准测试载体，构建成对的DBD‑operator测试质粒；S3、构建标准测试系统，测试不同菌株转录因子DBD‑operator的调控倍数，选出高效转录的转录因子DBD‑operator进行正交性测试，获得相互正交、高效转录调控的转录因子DBD‑operator。本发明构建方法对模块化的DBD‑operator进行测试筛选，最终得到了相互正交、高效转录调控的DBD‑operator。

主权项：1.一种模块化正交的高效转录因子DNA结合结构域系统的构建方法,其特征在于，包括以下步骤:S1、选取模块化转录因子的基本架构及其调控启动子的基本架构；S2、在转录因子和调控启动子的基本架构基础上，构建含有致死基因CCDB的标准测试载体，将外部获得的DNA结合结构域及操纵子序列插入所述标准测试载体的CCDB部分，构建成对的DBD-operator测试质粒；S3、将构建好的DBD-operator测试质粒和报告基因质粒共同整合到菌株中，获得测试菌株；对测试菌株进行测试培养，检测报告基因表达强度，测试不同菌株转录因子DBD-operator的调控倍数，选出高效转录的转录因子DBD-operator进行正交性测试，获得相互正交、高效转录调控的转录因子DBD-operator。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 中国科学院深圳先进技术研究院 一种模块化正交的高效转录因子DNA结合结构域系统的构建方法

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