申请/专利权人：2赛文缇生物公司

申请日：2022-07-19

公开（公告）日：2024-04-19

公开（公告）号：CN117916383A

主分类号：C12N15/867

分类号：C12N15/867;C12N15/86

优先权：["20210719 US 63/223,249"]

专利状态码：在审-公开

法律状态：2024.04.19#公开

摘要：本公开提供了病毒载体制备和纯化方法。具体地讲，本公开提供了用于由在悬浮液中生长的宿主细胞制备慢病毒载体的经改进的方法。更具体地讲，本公开提供了经改进的大规模慢病毒制备方法，所述大规模慢病毒制备方法包括：使细胞生长到合适数量；用慢病毒包装质粒、转移质粒和转染剂进行转染；用核酸内切酶进行处理；采集和澄清悬浮液培养物上清液；使用亲和色谱法或阳离子交换色谱法捕获所述慢病毒载体并使其浓缩；过滤经浓缩的慢病毒载体；对所述慢病毒载体进行超滤和渗滤；调配所述慢病毒载体；以及对经调配的散装慢病毒载体进行无菌过滤。

主权项：1.一种用于产生慢病毒载体的悬浮液方法sLVV，所述方法包括：a用活宿主细胞接种大规模悬浮液培养物；b用包括慢病毒包装质粒、转移质粒和转染剂的混合物瞬时转染所述大规模悬浮液培养物中的所述宿主细胞；c转染后转染开始后约36小时至约48小时将核酸内切酶添加到所述悬浮液培养物上清液中；d使用串联深层过滤器和双层过滤器采集和澄清所述悬浮液培养物上清液；e使用色谱法从所述所采集和澄清的悬浮液培养物上清液捕获所述慢病毒载体并使其浓缩；f过滤经浓缩的慢病毒载体；g使用切向流过滤TFF对所述慢病毒载体进行超滤和渗滤；以及h调配所述慢病毒载体以产生经调配的散装慢病毒载体，并且对所述经调配的散装慢病毒载体进行无菌过滤。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 2赛文缇生物公司 载体制备方法

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