申请/专利权人：南华大学

申请日：2021-09-17

公开（公告）日：2024-04-19

公开（公告）号：CN113791222B

主分类号：G01N33/68

分类号：G01N33/68;C12P21/06

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.04.19#授权;2021.12.31#实质审查的生效;2021.12.14#公开

摘要：本发明提供了一种d‑核糖快速诱导的人肌红蛋白非酶糖基化位点的鉴定方法，通过UPLC‑MS分析d‑核糖诱导的非酶糖基化人肌红蛋白，确定相应的糖基化肽段，然后对糖基化关键肽段进行ESI‑MSMS分析，确定糖基化位点，最后用PEAKSStudio软件进行处理，再用PEAKSDB在uniport_homosapiens数据库中进行搜索，验证糖基化位点。本发明首次通过该方法鉴定出d‑核糖诱导的人肌红蛋白非酶糖基化位点，为糖基化血红素蛋白的结构和功能研究奠定了基础。

主权项：1.一种d-核糖快速诱导的人肌红蛋白非酶糖基化位点的鉴定方法，其特征在于，通过UPLC-MS分析d-核糖诱导的非酶糖基化人肌红蛋白，确定相应的糖基化肽段，然后对糖基化肽段进行ESI-MSMS分析，确定糖基化位点，最后用PEAKSStudio软件进行处理，再用PEAKSDB在uniport_homosapiens数据库中进行搜索，验证糖基化位点；所述d-核糖诱导的非酶糖基化人肌红蛋白经胰蛋白酶酶切；所述UPLC-MS的色谱条件为：色谱柱为2.1×50mmC18反相柱；流动相A为质量浓度0.1％的HCOOH蒸馏水溶液，流动相B为质量浓度0.1％的HCOOH乙腈溶液；流速为0.2mLmin，按0～5min、流动相B：5％，5～45min、流动相B：5％→35％，45～50min、流动相B：35％→55％；50～55min、流动相B：55％，55～60min、流动相B：5％进行洗脱；流速为0.2mLmin；进样量为5μL；所述UPLC-MS分析采用的碎片方式是碰撞诱导解离CID；所述糖基化位点为K34、K56、K87、K147；所述搜索参数为：片段离子质量容限为0.02Da、母离子容限为7ppm；设置搜索固定修饰为氨基甲酰基化；设置搜索可变修饰为氧化，Met，+15.99Da；脱酰胺化，NQ，+0.98Da；乙酰化，N-末端，+42.01Da；核糖化，Lys和Arg，+132.04Da；筛选-10lgP≥20的肽段和-10lgP≥20且含有至少1个唯一肽段的蛋白段。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 南华大学 一种d-核糖快速诱导的人肌红蛋白非酶糖基化位点的鉴定方法

免责声明
1、本报告根据公开、合法渠道获得相关数据和信息，力求客观、公正，但并不保证数据的最终完整性和准确性。
2、报告中的分析和结论仅反映本公司于发布本报告当日的职业理解，仅供参考使用，不能作为本公司承担任何法律责任的依据或者凭证。

阅读全文 双屏查看 官方信息 专利公告 收藏专利 下载PDF 下载WORD