申请/专利权人:海南医学院;碧芯生物科技(海南省)有限公司
申请日:2022-10-25
公开(公告)日:2024-04-26
公开(公告)号:CN117925788A
主分类号:C12Q1/6844
分类号:C12Q1/6844;C12N15/11
优先权:
专利状态码:在审-实质审查的生效
法律状态:2024.05.14#实质审查的生效;2024.04.26#公开
摘要:本申请公开了一种高通量等温检测miRNA的方法和试剂盒。本申请方法包括对待测RNA样本进行逆转录,生成cDNA;采用针对miRNA设计的锁式探针,以cDNA为模板进行成环反应,将锁式探针连接成环;采用针对锁式探针设计的延伸引物,对成环产物进行滚环扩增;延伸引物5’端连接编码微球,滚环扩增时采用荧光标记dUTP替代dTTP;完成滚环扩增后,通过流式细胞仪检测荧光编码微球的编码荧光以及扩增产物的荧光强度,确定待测RNA样本的miRNA信息。本申请检测miRNA的方法和试剂盒,利用锁式探针和滚环扩增,能对多个miRNA靶标进行检测,为miRNA检测提供了一种新的高通量、低成本的高性价比的检测方法,对筛查与疾病相关的一些特异性miRNA具有重要意义。
主权项:1.一种检测miRNA的方法,其特征在于:包括对待测RNA样本进行逆转录,生成cDNA;采用针对miRNA设计的锁式探针,以所述cDNA为模板进行成环反应,将所述锁式探针连接成环;采用针对所述锁式探针的引物结合区设计的延伸引物,对连接成环的锁式探针进行滚环扩增;所述延伸引物的5’端连接编码微球,所述滚环扩增时采用荧光标记的dUTP替代dTTP;滚环扩增完成后,检测扩增产物的荧光信号,根据编码微球和dUTP的荧光标记信号确定待测RNA样本的miRNA信息。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 海南医学院;碧芯生物科技(海南省)有限公司 一种检测miRNA的方法和试剂盒
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