申请/专利权人：东台市浩瑞生物科技有限公司

申请日：2024-01-15

公开（公告）日：2024-04-26

公开（公告）号：CN117925489A

主分类号：C12N1/21

分类号：C12N1/21;C12N15/61;C12P19/02;C12R1/19

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.05.14#实质审查的生效;2024.04.26#公开

摘要：本发明公开了一种醛酮异构酶重组大肠杆菌湿菌体及湿菌体制备D‑阿洛糖的方法，涉及微生物选育技术领域，将醛酮异构酶重组大肠杆菌用灭菌水进行梯度稀释，得到稀释液，然后分别经选择培养基、平板培养基和LB培养基培养挑选得到培养菌液，培养菌液经发酵培养基的发酵诱导，得到醛酮异构酶重组大肠杆菌湿菌体，将醛酮异构酶重组大肠杆菌湿菌体加入到底物中，转化、结晶后得到高转化率的D‑阿洛糖产品。

主权项：1.一种醛酮异构酶重组大肠杆菌湿菌体的制备方法，其特征在于包括以下步骤：A：将醛酮异构酶重组大肠杆菌用灭菌水进行梯度稀释，得到稀释液；B：将步骤A中的稀释液0.08～0.12mL接于选择培养基上，37℃恒温培养8～12h，其中选择培养基配方为酵母粉4～6gL、蛋白胨9～11gL、氯化钠9～11gL、琼脂粉18～22gL、氰化亚铁0.08～0.12gL，其余为去离子水，pH值自然；C：挑选步骤B中颜色均匀单一、菌落凸起、菌落直径为0.5～3mm的一个单菌落，接种于平板培养基上37℃恒温培养8～12h，平板培养基配方为酵母粉4～6gL、蛋白胨9～11gL、氯化钠9～11gL、琼脂粉18～22gL，其余为去离子水，pH值自然；D：挑选步骤C中颜色均匀单一、菌落凸起、菌落直径为0.5～3mm的一个单菌落，接种于含0.08～0.12mM氰化亚铁的液体LB培养基中，37℃、200～240rpm下恒温培养，得培养菌液，LB培养基中其它组分的配方为酵母粉4～6gL、蛋白胨9～11gL、氯化钠9～11gL，其余为去离子水，pH值自然；E：将步骤D中培养菌液按照发酵培养基0.8～1.2％的体积接种到发酵培养基中，在发酵温度36～38℃、转速230～280rpm下进行发酵，发酵过程中添加0.08～0.12％wt氰化亚铁溶液和诱导剂IPTG，23～26℃恒温诱导8～10h，之后2800～3000rpm下离心，得醛酮异构酶重组大肠杆菌湿菌体。

全文数据：

权利要求：

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