申请/专利权人：康龙化成(宁波)科技发展有限公司;康龙化成(北京)新药技术股份有限公司

申请日：2023-05-15

公开（公告）日：2024-04-30

公开（公告）号：CN116626189B

主分类号：G01N30/02

分类号：G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.04.30#授权;2023.09.08#实质审查的生效;2023.08.22#公开

摘要：本申请涉及DNA编码化合物库领域，具体公开了一种基于LC‑MS对On‑DNA化学反应中DNA损伤的分析方法。该分析方法包括：选取内参样品和标准品，配制一组含有标准品与内参样品的标准液；将标准液进行LC‑MS分析，以标准品与内参样品的摩尔比为横坐标，以检测信号响应比值为纵坐标，得到标准工作曲线；利用内参样品进行On‑DNA化学反应后得到待测样品液，再与标准品混合后，进行LC‑MS分析，计算内参样品的回收率，并判断DNA损伤情况。该分析方法通过LC‑MS提供的样品分子量和信号强度的改变，可以在一天内完成对数百种反应类型的DNA损伤鉴定，这对于DEL文库的后期筛选及高通量分析有重要意义。

主权项：1.一种基于LC-MS对On-DNA化学反应中DNA损伤的分析方法，其特征在于，其包括：选取用于进行On-DNA化学反应的DNA标签，采用氨基保护基团对所述DNA标签进行氨基保护处理，得到内参样品；选择特定的DNA片段作为标准品，所述标准品与所述内参样品皆为DNA或On-DNA化合物，且所述标准品与所述内参样品的液相色谱峰的分离度＞1.5，且质谱峰不重合；配制一组含有所述标准品与所述内参样品的标准液，所述标准液中标准品与内参样品的摩尔比依次递减；将所述标准液进行LC-MS分析，以标准品与内参样品的摩尔比为横坐标，以标准品与内参样品的LC-MS的检测信号响应的比值为纵坐标，进行回归分析，得到标准工作曲线；配置含有所述内参样品的阴性对照液，将阴性对照液与标准品混合，在相同条件下进行LC-MS分析，得到检测信号强度，带入所述标准工作曲线，计算得到阴性回收率；利用所述内参样品进行On-DNA化学反应后，对反应液进行前处理，得到待测样品液，再与标准品混合后，在相同条件下进行LC-MS分析，得到检测信号响应，带入所述标准工作曲线，计算得到待测样品液中所述内参样品的物质的量，从而得到所述内参样品的回收率，并通过所述回收率以及所述内参样品的检测信号响应的变化来判断所述内参样品的DNA损伤情况。

全文数据：

权利要求：

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