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【发明授权】一种高通量等温扩增一站式检测装置及使用方法_华南农业大学_202110490627.X 

申请/专利权人:华南农业大学

申请日:2021-05-06

公开(公告)日:2024-05-17

公开(公告)号:CN113214974B

主分类号:C12M1/34

分类号:C12M1/34;C12M1/02;C12M1/00;C12Q1/6844;G06T7/00;G06T7/11;G06T7/90

优先权:

专利状态码:有效-授权

法律状态:2024.05.17#授权;2021.08.24#实质审查的生效;2021.08.06#公开

摘要:本发明公开了一种高通量等温扩增一站式检测装置及使用方法,一种高通量等温扩增一站式检测装置,包括检测暗盒、摄像设备、云端存储系统和计算机系统;所述检测暗盒包括盒体,所述盒体的一侧设有第一放置面,所述盒体的与所述第一放置面相对的一侧设有第二放置面,所述第一放置面与所述第二放置面倾斜设置,所述第一放置面设有第一支架。所述高通量等温扩增一站式检测装置,可以实现LAMP检测的核酸等温扩增反应过程、样品拍摄过程和检测结果分析过程的高通量一站式检测,结构简单且体积小,检测效率高,所述高通量等温扩增一站式检测装置的使用方法,可以在短时间内实现高通量的即时检测,检测过程操作方便,检测快速。

主权项:1.一种高通量等温扩增一站式检测装置的使用方法,其特征在于,所述高通量等温扩增一站式检测装置包括检测暗盒、摄像设备、云端存储系统和计算机系统;所述检测暗盒包括盒体,所述盒体的一侧设有第一放置面,所述盒体的与所述第一放置面相对的一侧设有第二放置面,所述第一放置面与所述第二放置面倾斜设置,所述第一放置面设有第一支架,所述第一支架用于支撑和放置样品加热架,所述第二放置面设有第二支架,所述第二支架用于支撑和放置所述摄像设备;所述样品加热架设有多个用于放置样品管的样品孔,所述样品孔贯穿所述样品加热架,所述第一放置面设置有通口,所述样品加热架放置于所述第一放置面的对应所述通口的位置,所述样品加热架的侧面设有多个加热片,所述第二放置面设有拍摄孔;所述盒体的底部呈敞开状,所述盒体的底部水平安装有隔板,所述隔板的上表面设有镜子,所述第一放置面所在的面与所述第二放置面所在的面的夹角为90°;所述摄像设备与所述云端存储系统信号连接,所述云端存储系统与所述计算机系统信号连接,所述摄像设备用于对所述镜子反射的所述样品加热架的样品颜色进行拍照并将获取的样品检测图像发送至所述云端存储系统;所述计算机系统从所述云端存储系统下载所述样品检测图像进行实时分析判断,生成定性检测结果后上传至所述云端存储系统;所述检测暗盒还包括温度控制器和热电偶温度传感器,所述样品加热架与所述热电偶温度传感器的输入端连接,所述热电偶温度传感器的输出端与所述温度控制器的输入端连接,所述温度控制器的输出端与所述加热片连接;所述高通量等温扩增一站式检测装置的使用方法,包括以下步骤:S1、将经过核酸提取的核酸样品加入甲酚红的LAMP反应体系中,混合均匀,得到待检测样品,将待检测样品加入八连管,将八连管放入样品加热架的样品孔中加热并进行等温扩增反应,反应完成后,关闭加热片的电源,待样品加热架的温度降至室温;S2、摄像设备通过拍摄孔进行拍照,获取样品检测图像并发送至云端存储系统;S3、计算机系统从云端存储系统下载所述样品检测图像并进行实时分析判断,生成定性检测结果后上传至云端存储系统;其中,所述步骤S3中,对样品检测图像进行实时分析判断,具体包括以下步骤:S31、分割每个样品检测孔,获取每个样品检测孔的圆心坐标;S32、将样品检测图像进行RGB色域转换为HSI色域的处理;S33、在步骤S31中获取的每个样品检测孔的圆心坐标的半径范围内,取所有点的Hue通道值的平均值作为检测值;S34、统计每个样品检测孔的检测值,将每个样品检测孔的检测值与阈值进行对比,设定检测值大于阈值的样品检测孔的检测结果为阳性,设定检测值小于阈值的样品检测孔的检测结果为阴性,生成定性检测结果;所述步骤S31中,分割每个所述样品检测孔具体包括以下步骤:S311、对所述样品检测图像的RGB通道进行滤波:将R通道值小于100的像素点设为0,将G通道值大于254的像素点设置为0,以及将B通道值大于254的通道的像素点设置为0;S312、对所述样品检测图像进行求反,求反后的图像与原图像相乘;所述步骤S31中,获取每个所述样品检测孔的圆心坐标具体采用霍夫变换的方法自动检测圆心坐标,或者采用Matlab的ginput函数手动选择圆心坐标;所述步骤S32中,所述HSI色域经过逆时针旋转70°的处理,具体的旋转步骤为:使用原始HSI色域模型归一化的Hue值进行计算,若H+0.194>1,则Hue值为H-0.806,若H+0.194<1,则Hue值为H+0.194;所述步骤S33中,所述半径范围为4~6个像素点;所述步骤S34中,采用最低拷贝数的质粒在甲酚红体系中反应60min后的检测值减去5倍检测值的标准差作为阈值。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 华南农业大学 一种高通量等温扩增一站式检测装置及使用方法

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