申请/专利权人：天津大学

申请日：2023-01-30

公开（公告）日：2023-05-30

公开（公告）号：CN116179663A

主分类号：C12Q1/6869

分类号：C12Q1/6869;C07K14/31

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2023.12.22#授权;2023.06.16#实质审查的生效;2023.05.30#公开

摘要：本发明公开了一种基于γ‑溶血素纳米孔道收缩区实现核酸单分子片段式测序的方法，步骤：构建纳米膜片钳装置，在电解池的顺式、反式检测池间设置固态孔，并设置盐溶液；在固态孔上附着磷脂层阻断固态孔；γ‑溶血素蛋白形成由前庭及β‑桶状结构组成的八聚体结构；其连接区域为收缩区；在磷脂层上构建γ‑溶血素纳米孔道，使顺、反式检测池间的液体贯通；施加电压，获得开孔电流；在顺式检测池内加入核酸单分子水溶液，施加电压，使核酸单分子片段式移位通过所述收缩区；测量阻断电流；据此识别核酸单分子，获取片段式测序信息。本发明对双链亚稳态构象动力学特性的精准检测，实现识别码末端3个碱基的高空间分辨率识别，实现目标序列高精准测序。

主权项：1.一种基于γ-溶血素纳米孔道收缩区实现核酸单分子片段式测序的方法，其特征在于包括以下步骤：构建纳米膜片钳装置，在所述纳米膜片钳装置中电解池的顺式检测池和反式检测池之间设置固态孔，使所述顺式检测池和所述反式检测池之间连通，所述顺式检测池内和反式检测池内分别设置有盐溶液；在所述固态孔上附着磷脂层，阻断所述顺式检测池和所述反式检测池之间的固态孔；制备γ-溶血素蛋白,所述γ-溶血素蛋白由分别来自于F类多肽与来自于S类多肽组装，形成由前庭及β-桶状结构组成的八聚体结构；前庭及β-桶状结构的连接区域为收缩区；在所述磷脂层上构建γ-溶血素纳米孔道，使所述顺式检测池和所述反式检测池之间的液体贯通；施加电压，获得开孔电流；在所述顺式检测池内加入核酸单分子水溶液，施加电压，使所述核酸单分子从γ-溶血素纳米孔道顺式端片段式移位通过所述收缩区；测量穿过所述γ-溶血素纳米孔道的阻断电流；根据测得的阻断电流识别所述核酸单分子，获取片段式测序信息。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 天津大学 一种基于γ-溶血素纳米孔道收缩区实现核酸单分子片段式测序的方法

免责声明
1、本报告根据公开、合法渠道获得相关数据和信息，力求客观、公正，但并不保证数据的最终完整性和准确性。
2、报告中的分析和结论仅反映本公司于发布本报告当日的职业理解，仅供参考使用，不能作为本公司承担任何法律责任的依据或者凭证。

阅读全文 双屏查看 官方信息 专利公告 收藏专利 下载PDF 下载WORD