申请/专利权人:浙江工业大学
申请日:2023-04-20
公开(公告)日:2023-08-22
公开(公告)号:CN116617412A
主分类号:A61K47/69
分类号:A61K47/69;A61K47/61;A61K47/54;A61K31/7088;A61K48/00;A61K38/46;A61P43/00
优先权:
专利状态码:在审-实质审查的生效
法律状态:2023.11.07#实质审查的生效;2023.08.22#公开
摘要:本发明涉及一种靶向编辑mtDNA的CRISPR‑Cas9递送载体的制备方法,其包括以下步骤,S1将Cas9蛋白和sgRNA混合,得到Cas9‑sgRNA复合物;S2所述Cas9‑sgRNA复合物、原硅酸四乙酯、以及双‑[3‑(三乙氧基硅)丙基]‑二硫化物在有机溶剂中,于氨水存在下进行反应,反应结束后经后处理,得到包覆可降解硅层的Cas9‑sgRNA复合物;S3在水中,所述包覆可降解硅层的Cas9‑sgRNA复合物和3‑氨丙基三乙氧基硅烷进行反应,反应结束后经后处理,将反应物依次经过三苯基膦修饰和透明质酸修饰,得到递送载体。本发明达到了精准编辑mtDNA、尤其是癌细胞上的mtDNA的效果。
主权项:1.一种靶向编辑mtDNA的CRISPR-Cas9递送载体的制备方法,其特征在于:包括以下步骤,S1将Cas9蛋白和sgRNA混合,得到Cas9-sgRNA复合物;其中,所述sgRNA包含以SEQIDNo:1所示的核苷酸序列、和或与SEQIDNo:1具有至少85%同源性的核苷酸序列;S2所述Cas9-sgRNA复合物、原硅酸四乙酯、以及双-[3-(三乙氧基硅)丙基]-二硫化物在有机溶剂中,于氨水存在下进行反应,反应结束后经后处理,得到包覆可降解硅层的Cas9-sgRNA复合物;S3在水中,所述包覆可降解硅层的Cas9-sgRNA复合物和3-氨丙基三乙氧基硅烷进行反应,反应结束后经后处理,将反应物依次经过三苯基膦修饰和透明质酸修饰,得到递送载体。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 浙江工业大学 一种靶向编辑mtDNA的CRISPR-Cas9递送载体的制备方法
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