申请/专利权人：蚌埠医学院

申请日：2023-02-14

公开（公告）日：2023-09-22

公开（公告）号：CN116083419B

主分类号：C12N15/10

分类号：C12N15/10;C12N15/70;A61K9/51;A61K47/10;A61K47/02;A61K47/34;A61K48/00;A61P15/08

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2023.09.22#授权;2023.05.26#实质审查的生效;2023.05.09#公开

摘要：本发明涉及基因工程技术领域，具体公开了一种RNA@PEI‑AuNP‑mPEG及其制备方法和应用，本发明通过体外转录生成lncRNAGm2044的RNA，PEI包覆的纳米金颗粒PEI‑AuNP的合成，载核酸纳米金颗粒RNA@PEI‑AuNP制备以及mPEG修饰载核酸纳米金颗粒RNA@PEI‑AuNP‑mPEG的制备最终获得了RNA@PEI‑AuNP‑mPEG。本发明制备得到的RNA@PEI‑AuNP‑mPEG能够通过静脉注射方式在睾丸中富集，不仅减少原位注射带来的创伤，而且减少对肝脏等器官的毒理影响。

主权项：1.一种RNA@PEI-AuNP-mPEG在制备治疗男性不育药物载体中的应用，其特征在于，所述RNA@PEI-AuNP-mPEG的制备过程包括如下步骤：S1，体外转录生成lncRNAGm2044的RNA：将序列如SEQIDNO.1所示的lncRNAGm2044的DNA序列插入pUC57-T7质粒载体，体外转录并生产RNA；S2，PEI包覆的纳米金颗粒PEI-AuNP的合成：将HAuCl4双蒸水溶液与PEI溶液混合，获得PEI包覆金单质颗粒溶液，透析、除去游离状态的PEI分子，获得PEI-AuNP溶液；S3，载核酸纳米金颗粒RNA@PEI-AuNP制备：将S1获得的RNA加入到S2制备得到的PEI-AuNP溶液中，室温下孵育15-25min，获得载核酸纳米金颗粒RNA@PEI-AuNP；所述PEI-AuNP与RNA质量比为10:1；S4，mPEG修饰载核酸纳米金颗粒RNA@PEI-AuNP-mPEG的制备：将mPEG-CH2COOH高分子加入MES缓冲液，然后分别加入EDC以及NHS静置30-40min，以HEPES缓冲液透析过夜，获得活化羧基的mPEG材料，然后过量加入至RNA@PEI-AuNP中，过夜，离心，双蒸水重悬，获得mPEG修饰载核酸金纳米颗粒RNA@PEI-AuNP-mPEG。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 蚌埠医学院 一种RNA@PEI-AuNP-mPEG及其制备方法和应用

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