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【发明公布】双重ddPCR检测碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌的序列、方法及应用_广州医科大学附属第一医院(广州呼吸中心)_202310837942.4 

申请/专利权人:广州医科大学附属第一医院(广州呼吸中心)

申请日:2023-07-10

公开(公告)日:2023-10-20

公开(公告)号:CN116904622A

主分类号:C12Q1/689

分类号:C12Q1/689;C12Q1/6851;C12N15/11;C12R1/01

优先权:

专利状态码:在审-实质审查的生效

法律状态:2023.11.07#实质审查的生效;2023.10.20#公开

摘要:双重ddPCR检测碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌的序列,方法及应用,收集临床分离的血培养检出鲍曼不动杆菌55株及27株涵盖真菌、细菌、病毒等微生物的菌株,柱提法提取相应的DNA后,用微滴式数字PCR的方法针对耐药基因OXA‑23及鲍曼不动杆菌特异性基因gltA建立双重反应体系,同时进行特异性、灵敏度、线性实验、重复性和临床样本验证。结果根据本实验建立起来的双重ddPCR方法重复性好RCV<25%,线性良好OXA‑23:y=1.4558x+4.0981,R2=0.9976;gltA:y=1.2716x+3.6092,R2=0.9949,双重qPCR检测灵敏度为3×10‑3ngμL,而双重ddPCR的灵敏度为3×10‑4ngμL,表明双重ddPCR的灵敏度比双重qPCR高;最低定量限为3×10‑3ngμL。

主权项:1.双重ddPCR检测碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌的目标序列为OXA23耐药基因;其特征在于:PCR检测鲍曼不动杆菌的特异性引物;通过对鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶耐药基因OXA-23上的片段设计,用实时荧光PCR来验证鲍曼不动杆菌能否检测出OXA23耐药基因;特异性引物具体为:

全文数据:

权利要求:

百度查询: 广州医科大学附属第一医院(广州呼吸中心) 双重ddPCR检测碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌的序列、方法及应用

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