申请/专利权人：中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所

申请日：2022-05-19

公开（公告）日：2023-12-29

公开（公告）号：CN114672498B

主分类号：C12N15/29

分类号：C12N15/29;C12N15/10;C12N15/70;C12N15/66;C12N15/82;A01H5/02;A01H6/20;C12R1/19

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2023.12.29#授权;2022.07.15#实质审查的生效;2022.06.28#公开

摘要：本发明公开蜻蜓凤梨AfCAL基因、克隆方法、表达载体及应用，提取蜻蜓凤梨总RNA，反转录合成cDNA，以此为模板，设计特异引物，利用PCR方法获得AfCAL基因的全长cDNA，与载体连接，转化大肠杆菌Trans‑T1感受态细胞，挑取阳性克隆得到蜻蜓凤梨AfCAL基因，该基因的cDNA全长1315bp，编码含253个氨基酸残基的蛋白质。利用实时荧光定量PCR测定了蜻蜓凤梨不同组织器官AfCAL基因的表达水平，AfCAL在蜻蜓凤梨中的表达量较高，说明蜻蜓凤梨AfCAL基因具有调控植物开花的功能。AfCAL基因的获得，为研究蜻蜓凤梨开花机理奠定了基础，为凤梨植物栽培中催花技术的提高提供了理论参考，具有重要的理论及实践意义。

主权项：1.一种蜻蜓凤梨AfCAL基因过表达促进拟南芥开花技术中的应用，其特征在于，所述应用具体为一种蜻蜓凤梨AfCAL基因单独使用过表达促进了拟南芥开花技术中的应用；所述蜻蜓凤梨AfCAL基因的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示；所述蜻蜓凤梨AfCAL基因的克隆方法包括以下步骤：1以蜻蜓凤梨为材料，利用CTAB法提取总RNA；2AfCAL基因的克隆；2-1利用Transgene公司的UniOne-StepgDNARemovalandcDNASynthesisSuperMixKit将RNA反转录为cDNA，作为PCR模板备用；2-2设计全长cDNA扩增引物；2-3根据引物的Tm值进行PCR条件的优化后，进行PCR扩增，并将获得的产物连接到大肠杆菌，经PCR和酶切鉴定后进行序列测定。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所 蜻蜓凤梨AfCAL基因、克隆方法、表达载体及应用

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