申请/专利权人:辽宁成大生物股份有限公司
申请日:2021-12-31
公开(公告)日:2023-12-29
公开(公告)号:CN114395539B
主分类号:C12N7/02
分类号:C12N7/02
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2023.12.29#授权;2022.05.13#实质审查的生效;2022.04.26#公开
摘要:本申请涉及病毒疫苗制品纯化领域,具体公开了去除乙脑疫苗制品残留宿主DNA和宿主蛋白的方法,具体步骤为;利用多模式介质CaptoMMC与凝胶过滤层析介质组合联用的方式,对乙脑疫苗浓缩灭活液进行纯化,从而达到去除宿主DNA与宿主蛋白的目的。本申请的优点是:利用多模式介质CaptoMMC与凝胶过滤层析介质组合联用的方式,对乙脑疫苗浓缩灭活液进行纯化,达到去除宿主DNA与宿主蛋白的目的,从而使成品乙脑疫苗DNA残留量与宿主蛋白残留量进一步降低,提高乙脑疫苗的产品质量。
主权项:1.去除乙脑疫苗制品残留宿主DNA和宿主蛋白的方法,其特征在于:将乙脑疫苗浓缩灭活液进行凝胶过滤层析,收集吸收峰;再将收集的纯化液进行多模式介质CaptoMMC层析,使DNA与宿主蛋白牢固吸附在多模式层析介质CaptoMMC上,而病毒蛋白直接穿透,从而达到进一步去除宿主DNA与宿主蛋白的目的,具体步骤为:(1)使用缓冲液平衡凝胶过滤层析介质至紫外、电导平衡,然后将乙脑疫苗浓缩灭活液加载到凝胶过滤层析介质中,紫外检测波长280nm,收集吸收峰为一步纯化液;(2)将一步纯化液加载到多模式层析介质CaptoMMC中,宿主DNA与宿主蛋白牢固吸附在多模式层析介质CaptoMMC上,而乙脑病毒蛋白直接穿透出来,紫外检测波长280nm,收集吸收峰,当样品全部加载后,继续用缓冲液洗脱,直到紫外吸收值降到基线,收集的穿透峰即为乙脑病毒蛋白最终纯化液。
全文数据:
权利要求:
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