申请/专利权人：云南省细胞质量检测评价中心有限公司

申请日：2023-12-05

公开（公告）日：2024-01-05

公开（公告）号：CN117344061A

主分类号：C12Q1/70

分类号：C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11;C12R1/93

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.01.23#实质审查的生效;2024.01.05#公开

摘要：本发明涉及生物技术领域，公开了一种同时检测五种人源病毒EBV、HBV、HCV、HIV、HPV的方法、试剂盒、引物和探针及其应用；通过优化五种人源病毒的特异性引物、特异性探针和qPCR程序，使其在混合检测中不会相互影响，可以达到单一病毒检测的效果。阳性对照采用分别包含五种人源病毒EBV、HBV、HCV、HIV和HPV的扩增靶序列的质粒，浓度为1×102copy，能够同时实现较高的检测灵敏度和对病毒的定量。采用本申请的方法能够混合同时检测五种人源病毒，最低检测限度为1copy，检测完成只需要2h，节约了检测过程所需的成本。

主权项：1.一种同时检测五种人源病毒EBV、HBV、HCV、HIV、HPV的方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）提取样本中的DNA；（2）构建标准曲线：使用特异性扩增五种人源病毒DNA的引物和探针组合对五种人源病毒的不同给定浓度的DNA标准品进行qPCR检测，并用检测结果制作标准曲线，拟合线性方程；（3）样品DNA检测：对样本DNA进行qPCR检测，并根据检测数据判断检测结果；其中，检测结果的判定方式：阳性条件为：检测通道Ct值≤29，且曲线为S形；阴性条件为：检测结果无Ct值，或Ct值30；试验有效的条件：阳性对照扩增曲线为S形，且Ct值≤29；阴性对照无Ct值，且无明显的扩增曲线；其中，引物的序列如SEQIDNo.1-SEQIDNo.10所示，探针序列如SEQIDNo.11-SEQIDNo.15所示。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 云南省细胞质量检测评价中心有限公司 一种同时检测五种人源病毒EBV、HBV、HCV、HIV、HPV的方法、试剂盒、引物和探针及其应用

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