申请/专利权人:国立大学法人京都大学
申请日:2018-05-23
公开(公告)日:2024-01-05
公开(公告)号:CN110662832B
主分类号:C12N5/0735
分类号:C12N5/0735;A61K35/22;A61L27/38;A61P13/12;C12N5/071;C12N5/10;C12N15/09
优先权:["20170525 JP 2017-104021"]
专利状态码:有效-授权
法律状态:2024.01.05#授权;2020.02.04#实质审查的生效;2020.01.07#公开
摘要:一种由多能干细胞制造肾祖细胞的方法,包括以下的工序i~vi。i将多能干细胞用含有FGF2、BMP4、GSK‑3β抑制剂和视黄酸或其衍生物的培养基培养的工序;ii将工序i中得到的细胞用含有FGF2、GSK‑3β抑制剂和BMP7的培养基培养的工序;iii将工序ii中得到的细胞用含有FGF2、GSK‑3β抑制剂、BMP7和TGFβ抑制剂的培养基培养的工序;iv将工序iii中得到的细胞用含有FGF2、GSK‑3β抑制剂、BMP7、激活素和ROCKRho激酶抑制剂的培养基培养的工序;v将工序iv中得到的细胞用含有视黄酸或其衍生物和FGF9的培养基培养的工序;以及vi将工序v中得到的细胞用含有GSK‑3β抑制剂和FGF9的培养基培养、由间介中胚层细胞诱导肾祖细胞的工序。
主权项:1.一种肾祖细胞的制造方法,包括将间介中胚层细胞用含有0.1~10μM的GSK糖原合酶激酶-3β抑制剂和10~500ngml的FGF成纤维细胞生长因子9的培养基黏附培养、由间介中胚层细胞诱导肾祖细胞的工序,所述间介中胚层细胞为通过包括以下的工序i~v的方法制造的间介中胚层细胞:i将多能干细胞用含有1ngml至1000ngml的FGF2、0.1ngml至100ngml的BMP骨形态发生蛋白4、0.01μM至100μM的GSK-3β抑制剂和1nM至100nM的视黄酸或其衍生物的培养基培养1天以上的工序;ii将工序i中得到的细胞用含有1ngml至1000ngml的FGF2、0.01μM至100μM的GSK-3β抑制剂和0.1ngml至100ngml的BMP7的培养基培养10小时以上的工序;iii将工序ii中得到的细胞用含有1ngml至1000ngml的FGF2、0.01μM至100μM的GSK-3β抑制剂、0.1ngml至100ngml的BMP7和0.5μM至100μM的TGFβ抑制剂的培养基培养1天以上的工序;iv将工序iii中得到的细胞用含有1ngml至1000ngml的FGF2、0.01μM至100μM的GSK-3β抑制剂、0.1ngml至100ngml的BMP7、1ngml至100ngml的激活素和0.1μM至100μM的ROCK抑制剂的培养基培养1天以上的工序;以及v将工序iv中得到的细胞用含有1nM至100nM的视黄酸或其衍生物和10~500ngml的FGF9的培养基培养1天以上的工序。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 国立大学法人京都大学 由间介中胚层细胞分化诱导肾祖细胞的方法和由多能干细胞分化诱导肾祖细胞的方法
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