申请/专利权人：内蒙古农业大学

申请日：2023-10-12

公开（公告）日：2024-01-12

公开（公告）号：CN117384842A

主分类号：C12N5/0789

分类号：C12N5/0789;C12N5/0786

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.01.30#实质审查的生效;2024.01.12#公开

摘要：本发明公开了奶牛骨髓源单核巨噬细胞诱导培养方法及应用，涉及生物技术领域。本发明通过在体外诱导分化骨髓中髓系祖细胞来分化成单核巨噬细胞，选择针对单核巨噬细胞特异性抗原受体的单克隆抗体进行细胞鉴定。建立一种获取奶牛骨髓细胞，并能够在体外诱导分化为单核巨噬细胞的方法，为今后从事相关领域研究的科研工作者提供技术支持。

主权项：1.奶牛骨髓源单核巨噬细胞诱导培养方法，其特征在于，包括以下步骤：1选取新鲜奶牛肋骨，剔除肋骨周围组织，将肋骨浸泡于75％酒精中10min；2在超净台中将肋骨分段，长度3-5cm，浸泡在RPMI-1640培养基中；使用20mL注射器抽取PBS缓冲溶液刺入奶牛肋骨骨髓腔，反复冲洗直至骨髓腔发白，得冲洗液；3将冲洗液过100μm细胞筛，4℃，1500rpmmin离心8min，弃上清，得细胞沉淀；加入2-4mL预热至37℃的红细胞裂解液重悬细胞沉淀，裂解10min，4℃，1000rpmmin离心5min，弃上清，得裂解后的细胞沉淀；裂解后的细胞沉淀即为骨髓造血干细胞；4用预热至37℃的诱导培养基重悬骨髓造血干细胞，均匀接种至无菌细胞培养瓶内，置于含5％体积分数CO2的37℃培养箱中进行培养；抽取细胞培养瓶中的细胞悬浮液更换新细胞培养瓶，每两个小时一次，重复5次，最后一次取10ul细胞悬液进行计数，以5×106个孔的密度铺于6孔细胞培养板中；5诱导7天后，即可获得得到成熟的M0型奶牛原代骨髓源巨噬细胞，加入1ugml脂多糖诱导24h，将M0型巨噬细胞诱导为M1型巨噬细胞。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 内蒙古农业大学 奶牛骨髓源单核巨噬细胞诱导培养方法及应用

免责声明
1、本报告根据公开、合法渠道获得相关数据和信息，力求客观、公正，但并不保证数据的最终完整性和准确性。
2、报告中的分析和结论仅反映本公司于发布本报告当日的职业理解，仅供参考使用，不能作为本公司承担任何法律责任的依据或者凭证。

阅读全文 双屏查看 官方信息 专利公告 收藏专利 下载PDF 下载WORD