申请/专利权人：宁德师范学院;福建柘参生物科技研究股份有限公司

申请日：2022-12-22

公开（公告）日：2024-01-26

公开（公告）号：CN115885854B

主分类号：A01H4/00

分类号：A01H4/00

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.01.26#授权;2023.04.21#实质审查的生效;2023.04.04#公开

摘要：本发明涉及一种低温诱导萌芽结合微茎尖培养脱除太子参病毒的方法，包括步骤S1：太子参组培苗的培养；步骤S2：太子参组培苗微块根的诱导形成；步骤S3：微块根低温诱导萌芽；步骤S4：微茎尖的剥取与培养；步骤S5：微茎尖组培苗的病毒检测，获得太子参脱病毒组培苗原原种。采用本方法，太子参经低温诱导、解除休眠后，其芽顶端分生组织细胞的分裂、生长等生理特性增强，细胞会快速分裂、生长，因此萌芽快。太子参微块根经低温诱导萌芽后，会形成体积较大的顶端生长点，呈球形，微茎尖容易剥取，剥取的微茎尖培养容易成活，可以培养出健壮小苗，成活率和脱毒率显著提高。

主权项：1.一种低温诱导萌芽结合微茎尖培养脱除太子参病毒的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤S1：取太子参植株的茎杆，消毒处理，切取顶芽和茎节进行无菌培养，获得太子参组培苗；步骤S2：将太子参组培苗接入微块根诱导培养基，培养温度24±1℃，光照强度56-60µmol·m-2·s-1，光照时间13-15h·d-1，培养150-180d，太子参组培苗形成微块根；步骤S3：将含微块根的无菌培养瓶置于0-2℃低温环境中，保存60-90d，微块根被低温诱导萌芽；步骤S4：取微块根萌发的芽，无菌剥取尺寸为0.1-0.2mm的微小茎尖，接入太子参诱导分化培养基，培养温度15-20℃，暗培养14-16d，然后转入弱光培养，弱光培养的光照强度为17-19µmol·m-2·s-1，培养温度保持15-20℃；30-35d后，转入同步骤S2的条件培养；培养50-60d后，形成小苗；步骤S5：将单个微茎尖培养成活的小苗分别标记，转接入太子参生根壮苗培养基，继代培养形成微茎尖组培苗株系，获得太子参脱毒组培苗原原种。

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