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【发明授权】一种发酵生产α-檀香烯的酵母工程菌及其应用_浙江大学杭州国际科创中心_202210093958.4 

申请/专利权人:浙江大学杭州国际科创中心

申请日:2022-01-26

公开(公告)日:2024-02-02

公开(公告)号:CN114507613B

主分类号:C12N1/19

分类号:C12N1/19;C12N15/52;C12N15/53;C12N15/54;C12N15/60;C12N15/61;C12N15/81;C12P15/00;C12R1/84;C12R1/865;C12R1/645

优先权:

专利状态码:有效-授权

法律状态:2024.02.02#授权;2022.06.03#实质审查的生效;2022.05.17#公开

摘要:本发明公开了一种发酵生产α‑檀香烯的酵母工程菌及其应用,属于生物工程领域。以酵母作为出发菌株,通过导入基因构建获得所述发酵生产α‑檀香烯的酵母工程菌。本发明的酵母工程菌可以高效生产α‑檀香烯,其摇瓶发酵产量近3.0gL,1L发酵罐发酵产量最高可达15gL。通过高表达代谢途径中关键限速酶、增强前体供应以及多拷贝策略,提高α‑檀香烯生物合成途径中的代谢通量,利用毕赤酵母高效生成α‑檀香烯,具有周期短、环保和节约资源的特点。本发明高产α‑檀香烯的酵母工程菌具有广阔的应用前景。

主权项:1.一种发酵生产α-檀香烯的酵母工程菌,其特征在于,以毕赤酵母作为出发菌株,通过导入基因构建获得所述酵母工程菌,导入基因包括以下任意一组:(1)檀香烯合酶SAS的编码基因、3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶1tHMG1的编码基因、异戊烯基焦磷酸异构酶IDI1的编码基因、法尼基焦磷酸合成酶ERG20的编码基因和乙酰辅酶A合酶ACS的编码基因;(2)檀香烯合酶SAS的编码基因、3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶1tHMG1的编码基因、异戊烯基焦磷酸异构酶IDI1的编码基因和法尼基焦磷酸合成酶ERG20的编码基因;所述檀香烯合酶SAS的编码基因如SEQIDNO.1所示,3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶1tHMG1的编码基因如SEQIDNO.2所示,异戊烯基焦磷酸异构酶IDI1的编码基因如SEQIDNO.3所示,法尼基焦磷酸合成酶ERG20的编码基因如SEQIDNO.4所示,乙酰辅酶A合酶ACS的编码基因如SEQIDNO.5所示;所述毕赤酵母为毕赤酵母GS115-Cas9,由毕赤酵母GS115菌株基因组引入Cas9蛋白编码基因得到;导入基因中檀香烯合酶SAS的编码基因为3个拷贝,其他编码基因为单拷贝;导入基因构建获得所述酵母工程菌中使用的启动子为pTEF或pGAP;终止子为tAOX1。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 浙江大学杭州国际科创中心 一种发酵生产α-檀香烯的酵母工程菌及其应用

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