申请/专利权人：湖南凯莱谱生物科技有限公司;凯莱谱(苏州)生物科技有限公司

申请日：2024-01-04

公开（公告）日：2024-02-06

公开（公告）号：CN117517549A

主分类号：G01N30/06

分类号：G01N30/06;B01D11/04;G01N30/14;G01N30/02;G01N30/72

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.02.27#实质审查的生效;2024.02.06#公开

摘要：本发明提供了一种同时检测乳汁中VK1、MK‑4和MK‑7的方法及萃取剂、试剂组合的用途，创新使用酶解法，脂肪酶和磷脂酶对乳汁进行酶解，增加乳汁中VK1、MK‑4和MK‑7的提取率，增加检测准确度，降低了基质效应，较文献报道降低VK1、MK‑4和MK‑7的定量下限10~70倍；采用由碳酸氢钠、磷酸盐缓冲液和三乙胺组成的缓冲液，增加了酶解效率，酶解后采用特定的液液萃取剂进行液液萃取，萃取剂包括异辛烷，一方面提高对VK1、MK‑4和MK‑7的提取率，另一方面减少了杂质的干扰，使得粗酶酶解的效果高于精制酶酶解效果，降低成本，便于酶制剂的保存和使用，使得本发明的方法更具可推广性。

主权项：1.一种液相色谱串联质谱同时检测乳汁中VK1、MK-4和MK-7的方法，其特征在于，包括步骤：S1酶解：脂肪酶和磷脂酶对乳汁样本进行酶解；S2液液萃取；S3离心，取上清液吹干，复溶；S4液相色谱串联质谱上机检测；所述脂肪酶、磷脂酶包括粗酶、精制酶中的任意一种或多种。

全文数据：

权利要求：

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