申请/专利权人：首都医科大学附属北京同仁医院

申请日：2023-09-27

公开（公告）日：2024-02-06

公开（公告）号：CN117512012A

主分类号：C12N15/86

分类号：C12N15/86;C12N5/10;C12Q1/02;C12R1/91

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.02.27#实质审查的生效;2024.02.06#公开

摘要：本发明属于细胞永生化构建技术领域，具体涉及一种永生化人巩膜成纤维细胞，并进一步公开其构建方法。本发明所述永生化人巩膜成纤维细胞的构建方法，利用磷酸钙转染法在HEK293T细胞中生成逆转录病毒颗粒后，经转染至原代人巩膜成纤维HSF细胞，再通过嘌呤毒素筛选出转染成功的人巩膜成纤维细胞，经培养生成永生化的巩膜成纤维细胞系。本发明所述方法可以构建稳定的离体人巩膜成纤维细胞系，克服原代细胞有限的分裂增殖能力，形成稳定的离体巩膜成纤维细胞来源，且永生化细胞系保持了和体内接近的生物学性状。

主权项：1.一种永生化人巩膜成纤维细胞的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：1取人巩膜成纤维细胞进行体外培养，作为原代人巩膜成纤维细胞，备用；2生成逆转录慢病毒颗粒；3将所述逆转录慢病毒颗粒转染所述原代人巩膜成纤维细胞，获得转染的人巩膜成纤维细胞；4筛选得到转染成功的所述人巩膜成纤维细胞；5对筛选出的转染成功的所述人巩膜成纤维细胞进行扩增培养，即得。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 首都医科大学附属北京同仁医院 一种永生化人巩膜成纤维细胞及其构建方法

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