申请/专利权人:南京启真基因工程有限公司
申请日:2020-11-19
公开(公告)日:2024-03-08
公开(公告)号:CN112522264B
主分类号:C12N15/113
分类号:C12N15/113;C12N15/85;C12N15/62;C12N15/12;C12N5/10
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2024.03.08#授权;2021.04.06#实质审查的生效;2021.03.19#公开
摘要:本发明公开了一种导致先天性耳聋的CRISPRCas9系统及其在制备模型猪核供体细胞中的应用。一种针对猪TMC1基因的gRNA表达载体,表达SEQIDNO:25所示的gRNA。一种用于猪TMC1基因编辑的CRISPRCas9系统,包含Cas9表达载体和本发明所述的gRNA表达载体,Cas9表达载体为质粒全序列如SEQIDNO.2所示。本发明针对猪TMC1基因设计了四个gRNA,从中筛选高效gRNA后再进行预设靶点的敲除,可有效降低后期单克隆细胞鉴定筛选的工作量,并可直接用PCR产物测序来检测基因编辑效率。采用本发明改造的Cas9高效表达载体进行基因编辑,编辑效率比原载体提高100%以上。
主权项:1.一种用于TMC1基因编辑的gRNA,其特征在于序列如SEQIDNO:25所示。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 南京启真基因工程有限公司 一种导致先天性耳聋的CRISPR/Cas9系统及其在制备模型猪核供体细胞中的应用
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