申请/专利权人：云南中烟工业有限责任公司

申请日：2021-11-22

公开（公告）日：2024-03-08

公开（公告）号：CN114085845B

主分类号：C12N15/29

分类号：C12N15/29;C12N15/84;A01H5/12;A01H6/82

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.03.08#授权;2022.03.15#实质审查的生效;2022.02.25#公开

摘要：本发明公开了一种烟草烟碱代谢相关的基因及其应用，该基因为NtLNP2基因，其序列为SEQIDNo.1，对该基因的序列进行翻译后，其所编码蛋白序列为SEQIDNo.2。利用CRISPRCas9系统敲除烟草烟碱代谢相关的基因的方法，包括以下步骤：1sgRNA引导序列的设计，sgRNA表达载体的构建；2将表达载体导入农杆菌；3侵染愈伤组织；4以GC‑MS进行NtLNP2基因纯合敲除素材的现蕾期叶片的烟碱含量的检测试验。本申请的基因和方法为烟草烟碱代谢基因功能研究及低烟碱烟草新品种培育研究提供遗传材料和理论依据。

主权项：1.一种烟草烟碱代谢相关的基因在降低烟草现蕾期叶片烟碱含量中的应用，其特征在于，所述烟草烟碱代谢相关的基因为NtLNP2基因，其序列为SEQIDNo.1，NtLNP2基因敲除编辑植株现蕾期的叶片烟碱含量显著低于对照植株；利用CRISPRCas9系统敲除烟草烟碱代谢相关的基因的方法包括以下步骤：（1）sgRNA引导序列的设计，sgRNA表达载体的构建；（2）将表达载体导入农杆菌；（3）侵染愈伤组织；（4）以GC-MS进行NtLNP2基因纯合敲除素材的现蕾期叶片的烟碱含量的检测试验；所述CRISPRCas9系统采用的sgRNA序列为GAGACCTGCAGATCTACCCGCGG，所述sgRNA序列采用的引物序列为：上游引物sgRNA-F：GATTGGAGACCTGCAGATCTACCCG；下游引物sgRNA-R：AAACCGGGTAGATCTGCAGGTCTCC；所述烟草的品种为红花大金元。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 云南中烟工业有限责任公司 一种烟草烟碱代谢相关的基因及其应用

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