申请/专利权人：右江民族医学院

申请日：2022-03-14

公开（公告）日：2024-03-12

公开（公告）号：CN114525281B

主分类号：C12N15/113

分类号：C12N15/113;C12N15/85;C12N15/53;C12Q1/02;C12Q1/6886

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.03.12#授权;2022.06.10#实质审查的生效;2022.05.24#公开

摘要：本发明提供了一种ESRP1启动子报告基因转录活性可视化及在去甲基化抗癌药物筛选中的应用，本发明构建了ESRP1启动子报告基因载体如SEQIDNO.3所示，将报告基因转染肿瘤细胞并建立稳定转染细胞株后，外源ESRP1基因启动子将整合至基因组，并与内源性启动子呈同步甲基化。当去甲基化类药物处理稳定转染细胞株后，因启动子去甲基化从而引起报告基因表达上调，荧光信号增强、细胞发光强度增加，因此可用于在体内外条件下监测DNA甲基化抑制剂抗癌药物作用效果。该报告基因可用于在活体小动物肿瘤模型中实时、无创地对抗癌药物疗效进行早期评价，为以DNA甲基化为靶点的抗癌药物筛选提供了一个强有力的工具。

主权项：1.一种稳定表达ESRP1启动子荧光素酶报告基因的肾癌细胞株，其构建方法为：构建含有ESRP1启动子荧光素酶报告基因的重组质粒，以含荧光素酶报告基因Luc2的pGL4.19-Luc2质粒为载体，在pGL4.19-Luc2质粒的KpnI和XhoI的限制性酶切位点之间，插入ESRP1基因启动子序列SEQIDNO.1，得到含有ESRP1启动子荧光素酶报告基因的重组质粒，所述ESRP1启动子荧光素酶报告基因的核苷酸序列如SEQIDNO.3所示；将含有ESRP1启动子荧光素酶报告基因的重组质粒转染至人肾癌细胞A498中，建立稳定表达ESRP1启动子荧光素酶报告基因的肾癌细胞株。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 右江民族医学院 ESRP1启动子报告基因转录活性可视化及在去甲基化抗癌药物筛选中的应用

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