申请/专利权人：贵阳学院

申请日：2023-11-16

公开（公告）日：2024-03-15

公开（公告）号：CN117700531A

主分类号：C07K14/825

分类号：C07K14/825;C12N15/12;C12N15/70;C12N1/21;C07K1/14;C07K1/22;C12R1/19

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.09#实质审查的生效;2024.03.15#公开

摘要：本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及大鲵金属硫蛋白AdMT基因的克隆、原核表达和蛋白纯化方法，从大鲵肝脏中提取总RNA，并进行逆转录反应合成cDNA，进行引物设计，以逆转录得到的cDNA为模板，进行PCR反应，将PCR产物连接到PGEM‑T载体上，并转化至Trans5α大肠杆菌感受态细胞中，完成编码基因的克隆，将大鲵金属硫蛋白AdMT的编码基因插入到表达载体pET28a‑SUMO的酶切位点BamHI和XhoI之间，并用T4DNA连接酶连接，构建重组表达载体SUMO‑AdMT，再将重组表达载体SUMO‑AdMT转化至RosettaDE3大肠杆菌感受态细胞中，获得重组基因工程菌，将重组基因工程菌接种至含硫酸卡那霉素和氯霉素双抗的LB培养基中，使用IPTG诱导蛋白表达。本发明以大鲵肝脏为原材料获取大鲵金属硫蛋白AdMT基因，材料易得，工艺简单。

主权项：1.大鲵金属硫蛋白AdMT，其特征在于，所述大鲵金属硫蛋白AdMT的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 贵阳学院 大鲵金属硫蛋白AdMT基因的克隆、原核表达和蛋白纯化方法

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